實驗六小鼠巨噬細胞吞噬現(xiàn)象的觀察

1、實驗六 巨噬細胞吞噬現(xiàn)象的觀察,1.通過觀察小鼠巨噬細胞吞噬紅細胞的試驗，了解巨噬細胞對異物吞噬的原理和功能。2.了解巨噬細胞在機體非特異免疫中的重要作用。,一、 實驗目的,高等動物體內的巨噬細胞、單核細胞和嗜中性粒細胞，具有吞噬作用的功能。它們廣泛分布在組織和血液中，在機體的非特異免疫功能中起著重要作用。當病原微生物或其他異物侵入機體時，能招引巨噬細胞，而巨噬細胞又有趨化性，它通過產生活躍的變形運動，主動向病原體和異物移行聚集，首

2、先把異物吸附在細胞表面，隨之，吸附區(qū)域的細胞膜向內凹陷，伸出偽足包圍異物，并吞入胞質，形成吞噬泡，繼而在細胞質中的初級溶酶體與吞噬泡融合，形成吞噬溶酶體，把病原體殺死，異物消化分解。巨噬細胞吞噬異物的能力在一定程度上反映了機體免疫水平的高低。,二、實驗原理,單核細胞（上）和巨噬細胞（下）,單核巨噬細胞吞噬過程示意圖,巨噬細胞正在吞噬衰老的紅細胞,巨噬細胞吞噬細菌（電鏡）,,肺巨噬細胞吞噬大腸桿菌（電鏡）,,1. 儀器、用具：顯微鏡、高

3、壓滅菌鍋、解剖盤、解 剖剪、1ml注射器、吸管、載玻片、蓋玻片。2. 材料：小鼠（體重20g左右），雞血。3. 試劑： 4%臺盼藍染液：臺盼藍染粉 0.4克，加0.85%生理鹽水100ml。 6%淀粉肉湯（含0.3%臺盼藍）：牛肉膏 0.3克；蛋白胨 1.0克；氯化鈉0.5克；蒸餾水 100ml。加熱后,可加入6.0克可溶性淀粉，促使溶解，再煮沸滅菌，置40C冰箱保存，用時水浴熔

4、化，加入適量4%臺盼藍染液混勻，使呈藍色。,三、實驗儀器、材料和試劑,1. 實驗前2d，每天給小白鼠腹腔注射6%淀粉肉湯液（含臺盼藍）1ml。2.實驗前，再向腹腔注射1ml 1%雞紅細胞懸液，并輕揉腹部，使雞紅細胞懸液分散。,四、方法與步驟,3. 20-30min后，用脊椎脫臼法處死小鼠（右手抓住鼠尾，用力向后拉，左手拇指與食指同時按著鼠頭后的頸部，使脊椎與腦髓間斷開致死）。 4. 迅速剖開腹腔，用未裝針頭的注射器或吸管吸

5、取 腹腔液。,5. 取一張干凈載 玻片，滴一滴腹 腔液，蓋上蓋玻 片，放置2分鐘~3 分鐘后在顯微鏡下 鏡檢。,觀察時，將視野光線調暗。在高倍鏡下，先分辨清雞紅細胞和巨噬細胞。雞紅細胞為淡黃色、橢圓形、有核的細胞。而數(shù)量較多、體積較大圓形或不規(guī)則的細胞，其表面有許多似毛刺裝的小突起（偽足），胞質中有數(shù)量不等的藍色顆粒（為吞入的含臺盼藍淀粉肉湯形成的吞噬泡）即為巨噬細胞。變換視野仔細觀察巨噬細胞

6、吞噬雞紅細胞的過程?？梢娪械碾u紅細胞（一至多個）緊貼附于巨噬細胞的表面；有的巨噬細胞已將1至數(shù)個紅細胞部分吞入；有的巨噬細胞已吞入一個或幾個紅細胞在胞質中剛剛形成橢圓形的吞噬泡；有的巨噬細胞內的吞噬泡體積縮小，并呈現(xiàn)圓形，這是與初級溶酶體發(fā)生融合，泡內物正在被消化分解。,五、實驗結果,六．注意事項,1、給小白鼠腹腔注射6%淀粉肉湯時要注意 進針適度，注射量要合適。2、給小白鼠腹腔注射時，抓小鼠不要太 緊，以免小鼠死亡。