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1、目的:探討CYP2A6*1、*2、*3、*4型基因多態(tài)性與煙草代謝物相關(guān)性冠心病的關(guān)系;探索一種簡(jiǎn)便快速的優(yōu)化PCR條件的方法。 方法:采用關(guān)聯(lián)分析,嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)對(duì)湖南地區(qū)漢族人群隨機(jī)選取,其中冠心病患者(CHD)205例[吸煙者(SM)129例,不吸煙者(NS)76例],正常(NC)對(duì)照208例(吸煙者78例,不吸煙者130例)。用均勻設(shè)計(jì)對(duì)影響PCR反應(yīng)的4個(gè)因素進(jìn)行優(yōu)化,應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析(PCR
2、-RFLP)對(duì)四組對(duì)象的CYP2A6基因型分布頻率進(jìn)行分析。 結(jié)果:(1)優(yōu)化的PCR反應(yīng)條件為:退火溫度61.2℃,模板50ng,鎂離子1.5mmol/L,Taq酶1.5U。 (2)正常對(duì)照組與冠心病組中CYP2A6四種基因型的分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(對(duì)照組X2=3.62,P>0.05;冠心病組X2=1.06,P>0.05),所選人群具有代表性。兩組對(duì)象CYP2A6基因型的分布頻率無(wú)顯著性差異。
3、 (3)吸煙組與不吸煙組中CYP2A6四種基因型的分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(對(duì)照組X2=0.32,P>0.05;冠心病組X2=0.63,P>0.05),所選人群具有代表性。吸煙組中CYP2A6*1的分布頻率大于不吸煙組(SM:93.72%VS NS:87.86%,P<0.05 X2=4.24),不吸煙組中CYP2A6*4分布頻率大于吸煙組(SM:5.31%VS NS:10.68%,P<0.05 X2=4.0
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