2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
   研究脂質(zhì)體介導(dǎo)的TK/GCV系統(tǒng)對人骨肉瘤細(xì)胞的殺傷作用及其產(chǎn)生的旁觀者效應(yīng)。
   方法:
   構(gòu)建重組質(zhì)粒pIRES-EGFP-tk,制備和轉(zhuǎn)化感受態(tài)大腸桿菌BL21以及鑒定測序,提取、純化重組質(zhì)粒DNA,培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染入骨肉瘤細(xì)胞株U-2OS,流式細(xì)胞儀分析和熒光倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),用轉(zhuǎn)染后的培養(yǎng)液的上清加入TK(-)U-2OS中觀察旁觀者效應(yīng)。
   結(jié)果:
   成

2、功地構(gòu)建出包含有tk基因cDNA片段的重組質(zhì)粒pIRES-EGFP-tk,通過PCR等方法鑒定質(zhì)粒大小和位點均符合實驗設(shè)計。熒光顯微鏡下觀察U-2OS(TK+)呈現(xiàn)綠色熒光。U-2OSTK/GCV培養(yǎng)上清液可明顯誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。但將上清液用0.2μm的濾膜濾過后,誘導(dǎo)凋亡作用消失。
   結(jié)論:
   成功構(gòu)建重組質(zhì)粒pIRES-EGFP-tk,體外實驗表明人骨肉瘤細(xì)胞系U-2OS對脂質(zhì)體介導(dǎo)的TK/GCV系統(tǒng)敏感,并且有

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