三氧化二砷對(duì)人膽管癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響及機(jī)制.pdf

1、目的:
　　 通過探討三氧化二砷(As2O3)對(duì)人膽管癌細(xì)胞系QBC-939異質(zhì)黏附力、侵襲穿膜能力及侵襲相關(guān)基因尿激酶型纖溶酶原激活因子(u-PA)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)表達(dá)的影響,為膽管癌的治療提供理論依據(jù)。
　　 方法:
　　 1、常規(guī)培養(yǎng)人膽管癌細(xì)胞系QBC-939。實(shí)驗(yàn)組加入4μmol/L的As2O3(預(yù)實(shí)驗(yàn)篩選出的有效濃度為4μmol/L),對(duì)照組加等體積RPMI-1640液,另設(shè)空白對(duì)照

2、組。37℃培養(yǎng)72 h(預(yù)實(shí)驗(yàn)篩選出的有效培養(yǎng)時(shí)間為72h),培養(yǎng)結(jié)束后分別于不同時(shí)間點(diǎn)(30min、60 min、90 min、120 min)采用MTT法檢測膽管癌細(xì)胞異質(zhì)黏附能力。
　　 2、將對(duì)照組細(xì)胞(只加入RPMI-1640培養(yǎng)液)及不同濃度As2O3組細(xì)胞(1、2、4、8μmol/L)分別接種于Transwell趨化小室,培養(yǎng)72h后,檢測膽管癌細(xì)胞侵袋穿膜能力。
　　 3、以不同濃度As2O3(1、2、4

3、、8μmol/L)作用膽管癌細(xì)胞72h,4μmol/LAs2O3作用(24、48、72、96 h)不同時(shí)間后,RT-PCR方法檢測u-PA、MMP-9mRNA在膽管癌細(xì)胞中表達(dá)的變化。
　　 結(jié)果:
　　 1、經(jīng)4μmol/L As2O3預(yù)處理人膽管癌細(xì)胞72h后,實(shí)驗(yàn)組腫瘤細(xì)胞30、60、90、120 min時(shí)黏附率分別為82.4％、79％、75.2％、71.4％,以120分鐘時(shí)黏附率最低(71.4％),各實(shí)驗(yàn)組與相應(yīng)

4、對(duì)照組的100％相比,P均<0.05。但30分鐘時(shí)與60分鐘時(shí)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 2、經(jīng)2、4、8μmol/L的As2O3作用72h后,QBC-939穿膜細(xì)胞數(shù)分別為(70±9)、(37±6)、(21±4)個(gè)。各組與對(duì)照組的(97±7)個(gè)相比,P均<0.05。隨As2O3濃度增加,實(shí)驗(yàn)組穿膜細(xì)胞數(shù)逐漸減少(P<0.05)。
　　 3、經(jīng)不同濃度As2O3作用72h后,實(shí)驗(yàn)組隨As2O3濃度增加u

5、PA、MMP-9mRNA表達(dá)逐漸下降(P<0.05),4μmol/L組抑制最明顯。
　　 4μmol/L的As2O3作用不同時(shí)間后,隨作用時(shí)間延長uPA、MMP-9mRNA表達(dá)逐漸下降,72h時(shí)下降最明顯。
　　 結(jié)論:
　　 一定濃度的As2O3(4μmol/L)可有效抑制人膽管癌細(xì)胞黏附能力。
　　 As2O3呈劑量依賴性抑制人膽管癌細(xì)胞侵襲穿膜能力。
　　 As2O3呈劑量時(shí)間依賴性抑制人膽