反義CD147分子對人膽管癌細(xì)胞株侵襲性影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　探討反義CD147分子對人膽管癌細(xì)胞株QBC939侵襲性的影響。
　　材料和方法：
　　構(gòu)建含反義 CD147分子片段的重組真核表達(dá)質(zhì)粒。將人膽管癌細(xì)胞株QBC939分為三組：
　　1.反義CD147組：運(yùn)用重組真核表達(dá)質(zhì)粒asCD147-pcDNA3.1(-)轉(zhuǎn)染QBC939細(xì)胞；
　　2.空質(zhì)粒組：運(yùn)用pcDNA3.1(-)空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染QBC939細(xì)胞；
　　3.對照組：運(yùn)用DMEM常規(guī)

2、處理細(xì)胞。采用MTT法檢測各組中QBC939細(xì)胞的生長情況，采用RT-PCR和Western-Blotting法分別對三組QBC939細(xì)胞中的CD147mRNA、MMP-2mRNA、MMP-9mRNA、TIMP-2mRNA的表達(dá)水平及其對應(yīng)蛋白的表達(dá)水平進(jìn)行檢驗(yàn)。
　　結(jié)果：
　　構(gòu)建了攜帶反義CD147分子片段的重組真核表達(dá)質(zhì)粒，MTT法檢測顯示：三組QBC939細(xì)胞的生長曲線及對數(shù)生長期情況兩兩相比無顯著差異（P>0.0

3、5）。RT-PCR法檢測顯示：反義CD147組QBC939細(xì)胞中CD147 mRNA的表達(dá)與空質(zhì)粒組及對照組兩兩相比明顯降低（P<0.05），空質(zhì)粒組與對照組相比無顯著差異（P>0.05）；反義CD147組QBC939細(xì)胞中MMP-2mRNA的表達(dá)與空質(zhì)粒組和對照組兩兩相比明顯降低（P<0.05），空質(zhì)粒組與對照組相比無顯著差異（P>0.05）；反義CD147組QBC939細(xì)胞中MMP-9mRNA的表達(dá)與空質(zhì)粒組和對照組兩兩相比無顯著差

4、異(P>0.05)；反義CD147組QBC939細(xì)胞中TIMP-2mRNA的表達(dá)與空質(zhì)粒組和對照組兩兩相比無顯著差異(P>0.05)。Western-blotting檢測發(fā)現(xiàn)：反義CD147組QBC939細(xì)胞中CD147蛋白的表達(dá)與空質(zhì)粒組和對照組兩兩相比明顯降低（P<0.05），空質(zhì)粒組與對照組相比無顯著差異（P>0.05）；反義CD147組QBC939細(xì)胞中MMP-2蛋白的表達(dá)與空質(zhì)粒組和對照組兩兩相比明顯降低（P<0.05），空質(zhì)

5、粒組與對照組相比無顯著差異（P>0.05）；反義CD147組QBC939細(xì)胞株中MMP-9蛋白的表達(dá)與空質(zhì)粒組和對照組兩兩相比無顯著差異(P>0.05)；反義CD147組QBC939細(xì)胞株中TIMP-2蛋白的表達(dá)與空質(zhì)粒組和對照組兩兩相比無顯著差異(P>0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.反義CD147對膽管癌細(xì)胞株QBC939的生長無影響。
　　2.反義CD147對膽管癌細(xì)胞株QBC939中 MMP-9mRNA及TIM