用分子組織工程學(xué)方法研究轉(zhuǎn)化生長因子β_1對骨髓基質(zhì)干細(xì)胞生物活性的影響.pdf

1、分子組織工程學(xué)是將分子生物學(xué)與組織工程學(xué)有機(jī)結(jié)合，運(yùn)用分子生物學(xué)的理論和技術(shù)，從分子水平研究細(xì)胞、組織誘導(dǎo)因子、生物材料及其相互作用的關(guān)系，為研制能更有效地恢復(fù)、維持或改善病損組織或器官功能的生物替代物奠定基礎(chǔ)。本研究以骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)作為靶細(xì)胞，TGFβ_1基因片段作為目的基因，經(jīng)LipofectAMINE轉(zhuǎn)染目的基因與靶細(xì)胞中，觀察BMSCs經(jīng)基因轉(zhuǎn)染后的生物學(xué)特性。探討B(tài)MSCs作為基因治療的靶細(xì)胞的可能性及BMSCs

2、自身分泌的TGFβ_1對其生物學(xué)特性的影響。 實(shí)驗(yàn)方法：載體pcDNA3-TGFβ_1構(gòu)建后，取新西蘭兔骨髓，分離培養(yǎng)BMSCs，通過脂質(zhì)體LipofectAMINEA介導(dǎo)pcDNA3-TGFβ_1基因和空載pcDNA3轉(zhuǎn)染BMSCs。采用電泳檢測pcDNA3-TGFβ_1構(gòu)建是否成功；通過TGFβ_1免疫組化染色檢測轉(zhuǎn)染是否成功；運(yùn)用形態(tài)學(xué)觀察、透射電鏡(TEM)、流式細(xì)胞儀(FCM)、堿性磷酸酶(ALP)染色、Ⅱ型膠原免疫組