酒精對(duì)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的影響研究.pdf

1、目的:對(duì)兔股骨頭髓內(nèi)間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行分離，分析觀察充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)在體外培養(yǎng)狀態(tài)下的生長(zhǎng)情況，對(duì)兩種成骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化方法及分化能力進(jìn)行對(duì)比，并研究觀察酒精對(duì)體外培養(yǎng)成骨細(xì)胞凋亡的影響。
　　 方法:運(yùn)用密度梯度離心法獲取兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，采用倒置顯微鏡進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察;實(shí)驗(yàn)組:為用含有誘導(dǎo)劑的低糖DMEM培養(yǎng)基的誘導(dǎo)培養(yǎng)組;對(duì)照組:為常規(guī)培養(yǎng)組，倒置顯微鏡HE染色觀察記錄各代次細(xì)胞形態(tài)等特征;通過(guò)堿性磷酸酶(ALP)染色

2、及標(biāo)準(zhǔn)化鈣結(jié)節(jié)計(jì)數(shù)，鑒定細(xì)倒置顯微鏡及HE染色觀察記錄細(xì)胞形態(tài)等特征。體外分離培養(yǎng)成骨細(xì)胞后，隨機(jī)分組進(jìn)行不同濃度酒精干預(yù)，利用AO/EB染色觀察細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)改變。
　　 結(jié)果:培養(yǎng)12天后對(duì)兩組細(xì)胞進(jìn)行ALP染色，顯示實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞質(zhì)內(nèi)ALP染色陽(yáng)性反應(yīng)明顯，對(duì)照組染色顯色弱，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞鈣化結(jié)節(jié)數(shù)量多且較大，對(duì)照組也有鈣結(jié)節(jié)形成，但較小。實(shí)驗(yàn)組標(biāo)準(zhǔn)化鈣結(jié)節(jié)計(jì)數(shù)顯著高于對(duì)照組，差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05），加入0.15