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文檔簡介
1、目的:對兔股骨頭髓內(nèi)間充質(zhì)干細胞進行分離,分析觀察充質(zhì)干細胞(BMSCs)在體外培養(yǎng)狀態(tài)下的生長情況,對兩種成骨細胞誘導(dǎo)分化方法及分化能力進行對比,并研究觀察酒精對體外培養(yǎng)成骨細胞凋亡的影響。
方法:運用密度梯度離心法獲取兔骨髓間充質(zhì)干細胞,采用倒置顯微鏡進行形態(tài)學(xué)觀察;實驗組:為用含有誘導(dǎo)劑的低糖DMEM培養(yǎng)基的誘導(dǎo)培養(yǎng)組;對照組:為常規(guī)培養(yǎng)組,倒置顯微鏡HE染色觀察記錄各代次細胞形態(tài)等特征;通過堿性磷酸酶(ALP)染色
2、及標(biāo)準(zhǔn)化鈣結(jié)節(jié)計數(shù),鑒定細倒置顯微鏡及HE染色觀察記錄細胞形態(tài)等特征。體外分離培養(yǎng)成骨細胞后,隨機分組進行不同濃度酒精干預(yù),利用AO/EB染色觀察細胞凋亡形態(tài)學(xué)改變。
結(jié)果:培養(yǎng)12天后對兩組細胞進行ALP染色,顯示實驗組細胞質(zhì)內(nèi)ALP染色陽性反應(yīng)明顯,對照組染色顯色弱,實驗組細胞鈣化結(jié)節(jié)數(shù)量多且較大,對照組也有鈣結(jié)節(jié)形成,但較小。實驗組標(biāo)準(zhǔn)化鈣結(jié)節(jié)計數(shù)顯著高于對照組,差異具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),加入0.15
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