酒精對兔骨髓間充質(zhì)干細胞成骨分化的影響研究.pdf

1、目的:對兔股骨頭髓內(nèi)間充質(zhì)干細胞進行分離，分析觀察充質(zhì)干細胞(BMSCs)在體外培養(yǎng)狀態(tài)下的生長情況，對兩種成骨細胞誘導(dǎo)分化方法及分化能力進行對比，并研究觀察酒精對體外培養(yǎng)成骨細胞凋亡的影響。
　　 方法:運用密度梯度離心法獲取兔骨髓間充質(zhì)干細胞，采用倒置顯微鏡進行形態(tài)學(xué)觀察;實驗組:為用含有誘導(dǎo)劑的低糖DMEM培養(yǎng)基的誘導(dǎo)培養(yǎng)組;對照組:為常規(guī)培養(yǎng)組，倒置顯微鏡HE染色觀察記錄各代次細胞形態(tài)等特征;通過堿性磷酸酶(ALP)染色

2、及標(biāo)準(zhǔn)化鈣結(jié)節(jié)計數(shù)，鑒定細倒置顯微鏡及HE染色觀察記錄細胞形態(tài)等特征。體外分離培養(yǎng)成骨細胞后，隨機分組進行不同濃度酒精干預(yù)，利用AO/EB染色觀察細胞凋亡形態(tài)學(xué)改變。
　　 結(jié)果:培養(yǎng)12天后對兩組細胞進行ALP染色，顯示實驗組細胞質(zhì)內(nèi)ALP染色陽性反應(yīng)明顯，對照組染色顯色弱，實驗組細胞鈣化結(jié)節(jié)數(shù)量多且較大，對照組也有鈣結(jié)節(jié)形成，但較小。實驗組標(biāo)準(zhǔn)化鈣結(jié)節(jié)計數(shù)顯著高于對照組，差異具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05），加入0.15