噬菌體展示日本血吸蟲(chóng)SSj14單抗的模擬表位及免疫保護(hù)性研究.pdf

1、　　本文采用日本血吸蟲(chóng)保護(hù)性單抗ssj14從噬菌體隨機(jī)十二肽庫(kù)中篩選日本血吸蟲(chóng)(schistosomajaponicum，sj)的保護(hù)性模擬抗原表位，并研究其在日本血吸蟲(chóng)保護(hù)性免疫預(yù)防中的作用及機(jī)理。選取3個(gè)具有免疫活性的噬菌體克隆及富集后的混合噬菌體，按1.5×1011pfu/鼠的劑量與弗氏佐劑混合，在0，2，4周，皮下注射免疫BALB/c鼠，以原始肽庫(kù)和TBS為對(duì)照組。于末次免疫后兩周，按40±1條/鼠腹部貼片感染日本血吸蟲(chóng)尾蚴。攻

2、擊感染42天后剖殺所有小鼠，計(jì)數(shù)獲檢蟲(chóng)體數(shù)和蟲(chóng)卵數(shù)，計(jì)算各組減蟲(chóng)率和減卵率。 研究結(jié)果：三輪篩選后，陽(yáng)性噬菌體得到有效富集，直接ELISA檢測(cè)到陽(yáng)性克隆率為90﹪；對(duì)30個(gè)隨機(jī)陽(yáng)性噬菌體克隆進(jìn)行測(cè)序，得到11種多肽序列，其中陽(yáng)性混合噬菌體的免疫抑制率最高，可達(dá)67.03﹪；混合噬菌體免疫組IL-12平均濃度為30.34pg/ml，顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)。以IL-12為佐劑的多肽疫苗和弗氏佐劑多肽疫苗免疫小鼠后，分別得到2