TWEAK在肝癌細(xì)胞系高-低淋巴道轉(zhuǎn)移株中表達(dá)的初步分析.pdf

1、腫瘤轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的重要特征，也是惡性腫瘤患者的主要死因。腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制的闡明，對(duì)認(rèn)識(shí)腫瘤的生物學(xué)本質(zhì)具有理論意義，對(duì)治療腫瘤有應(yīng)用價(jià)值。腫瘤淋巴道轉(zhuǎn)移較早，腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移至局部淋巴結(jié)可被視為腫瘤轉(zhuǎn)移的早期信號(hào)。但是目前對(duì)于腫瘤轉(zhuǎn)移的研究多集中于血道轉(zhuǎn)移，對(duì)腫瘤淋巴道轉(zhuǎn)移的相關(guān)報(bào)道較少。本研究旨在揭示TWEAK蛋白在高\(yùn)低淋巴道轉(zhuǎn)移株(Hca-F\Hca-P)中的表達(dá)，為進(jìn)一步探討腫瘤的淋巴道轉(zhuǎn)移奠定基礎(chǔ)。 目的：研究腫瘤壞死因子樣

2、弱凋亡因子(Tumornecrosisfacter-likeweakinducerofapoptosis，TWEAK)在小鼠腹水型肝癌細(xì)胞系高\(yùn)低淋巴道轉(zhuǎn)移株(Hca-F\Hca-P)中的表達(dá)情況及差異。 方法：分別提取Hca-F和Hca-P細(xì)胞的總RNA，應(yīng)用基因芯片檢測(cè)TWEAK基因；通過RT-PCR在mRNA水平驗(yàn)證TWEAK基因的表達(dá)；提取Hca-F和Hca-P細(xì)胞的總蛋白，用蛋白印跡法從蛋白表達(dá)水平驗(yàn)證差異表達(dá)；免疫組

3、織化學(xué)法驗(yàn)證TWEAK蛋白的表達(dá)。 結(jié)果：基因芯片檢測(cè)到TWEAK在Hca-F和Hca-P有顯著差異，Hca-P的TWEAK基因表達(dá)較Hca-F高2.1倍；RT-PCR驗(yàn)證在兩株細(xì)胞中均有TWEAK基因的表達(dá)，且低轉(zhuǎn)移株強(qiáng)于高轉(zhuǎn)移株；蛋白免疫印跡法檢測(cè)到兩株細(xì)胞表面均有TWEAK蛋白的表達(dá)，低轉(zhuǎn)移株強(qiáng)于高轉(zhuǎn)移株，與基因芯片的結(jié)果一致。免疫組織化學(xué)表明，在Hca-F和Hca-P轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中TWEAK蛋白表達(dá)量明顯增加，且在Hca-