柑桔碎葉病毒RT-PCR檢測技術(shù)研究及應(yīng)用.pdf

1、由柑桔碎葉病毒(citrustatterleafvirus，CTLV)引起的柑桔碎葉病最早于1962年在隱癥的北京檸檬上發(fā)現(xiàn)。CTLV可感染許多柑桔品種，引起用枳及其雜種作砧木的柑桔樹嫁接口不親和、植株矮化和葉片黃花。CTLV在我國分布相當(dāng)普遍，越來越多地使用感病砧木，會嚴(yán)重影響我國的柑桔產(chǎn)業(yè)。CTLV傳統(tǒng)的檢測方法是指示植物鑒定，但其鑒定周期長，季節(jié)性強(qiáng)，且需要溫網(wǎng)室等設(shè)施。因此，有必要建立快速穩(wěn)定檢測CTLV的技術(shù)。本研究參考Hai

2、lstones等[1]建立的CTLV半巢式RT-PCR檢測技術(shù)對田間病樹不同部位和方位取樣進(jìn)行了檢測實驗，對四種感病寄主進(jìn)行了全年檢測和CTLV部分序列測定分析，并應(yīng)用該技術(shù)對“948”項目引進(jìn)的23個柑桔品種材料和重慶市百萬噸工程項目788株過渡期候選母樹進(jìn)行了快速鑒定。主要結(jié)論如下： 1、對同一種感病的寄主材料不同部位取樣檢測表明：除老皮外均能檢測到CTLV；對兩種感病的寄主材料，分別從同一株病樹的三個不同方位取樣檢測表明：

3、除14-2有一個方位外，均能檢測到CTLV。說明CTLV在植株內(nèi)分布不均勻。 2、對四種感病的寄主材料進(jìn)行全年檢測表明：該方法可以全年對田間的柑桔植株進(jìn)行檢測；但在8月份，經(jīng)半巢式RT-PCR后電泳條帶較弱。 3、對“948”項目和重慶市柑桔百萬噸工程樣品快速鑒定表明：“948”項目引進(jìn)的23個柑桔品種材料均呈陰性反應(yīng)，百萬噸工程788株候選母樹中有21株呈陽性反應(yīng)，765株呈陰性反應(yīng)。 4、該方法可對甜橙類、柚