聯(lián)合阻斷STAT3和HIF-1α對(duì)低氧條件下喉癌Hep-2細(xì)胞放療及化療的增敏作用.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師(或指導(dǎo)小組)的指導(dǎo)下，由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果，其知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對(duì)本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開(kāi)和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名單位為河北醫(yī)科大學(xué)，試驗(yàn)材料、原始數(shù)據(jù)、申報(bào)的專利等知識(shí)產(chǎn)權(quán)均歸河=任。研究生簽名謝導(dǎo)師河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文

2、中特別加以標(biāo)注等內(nèi)容外，文中不包含其他人已發(fā)表或撰寫(xiě)的研究成果，指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫(xiě)，文責(zé)自負(fù)。研究生簽名：鼬坂導(dǎo)師簽章：二鑾≥呻即哆砌，爭(zhēng)年弓月糾日中文摘要聯(lián)合阻斷STAT3和F1Q對(duì)低氧條件下喉癌Hep2細(xì)胞放療及化療的增敏作用摘要目的：信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子3(signaltransducerandactivatoroftranscription3，STAT3)信號(hào)通路在人類多種腫瘤中持續(xù)激活，影響腫瘤細(xì)胞

3、增殖、凋亡、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移。低氧誘導(dǎo)因子10【(hypoxiainduciblefactor1a，HIF1a)是機(jī)體在低氧條件下產(chǎn)生的一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子，它能調(diào)節(jié)多種低氧反應(yīng)基因的轉(zhuǎn)錄。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)單獨(dú)和聯(lián)合抑制喉癌Hep2細(xì)胞中HIF1a和STAT3的表達(dá)探討低氧微環(huán)境下HIF—la和STAT3對(duì)喉癌Hep一2細(xì)胞放療及化療抵抗作用的影響。方法：首先分別在37。C、5％c02、20％02和95％濕度條件下的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)人喉鱗狀細(xì)胞癌Hep2細(xì)

4、胞和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染HIF—lashRNA的Hep一2(Hep一2ⅢB1a4)細(xì)胞，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，分別用于以下實(shí)驗(yàn)：1分別于常氧及低氧條件下培養(yǎng)Hep一2細(xì)胞及Hep一2H1F。1叫。細(xì)胞，WesternBlot檢測(cè)HIF1a的表達(dá)情況。2低氧條件培養(yǎng)喉癌Hep2細(xì)胞及Hep2HIFI細(xì)胞，予不同濃度的AG490(0pg／ml、30txg／ml、5099／ml、1001xg／m1)作用24h用MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況。3以50pg／ml的A

5、G490作用于喉癌Hep2細(xì)胞及Hep2ⅢF‘m卜細(xì)胞，WesternBlot檢測(cè)細(xì)胞中HIF1et、P—STAT3的表達(dá)情況。4以50肛g／ml的AG490分別與不同放射劑量(OGy、5Gy、lOGy、15Gy、20Gy)的放射線照射及不同濃度順鉑(0lxg／ml、05叫ml、1州ml、2叫ml、5州m1)聯(lián)用，用MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況。結(jié)果：lAG490在體外低氧條件下能夠有效的抑制Hep2細(xì)胞及Hep2H1F。k卜細(xì)胞的生長(zhǎng)，且