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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:經(jīng)汽化吸入全氟化碳(perfluorocarbon,PFC)治療內(nèi)毒素性急性肺損傷(acutelunginjury,ALI)動(dòng)物模型,觀察汽化吸入PFC對(duì)ALI動(dòng)物表面活性蛋白和基質(zhì)金屬蛋白酶的影響。
方法:健康雌性新西蘭白兔24只(平均體重2.48±0.30kg),隨機(jī)分為4組:①急性肺損傷汽化吸入PFC治療組(ALI+PFC組):通過靜脈注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)(2.5mg/kg)制
2、作急性肺損傷動(dòng)物模型,然后在常規(guī)機(jī)械通氣(容量控制f:40/min,F(xiàn)iO2:0.6,I:E1:1.5,PEEP5cmH2O)的基礎(chǔ)上,經(jīng)呼吸機(jī)吸氣管路以濕化器加熱PFC的方法給予汽化吸入PFC治療2小時(shí),然后繼續(xù)常規(guī)機(jī)械通氣6小時(shí)。②急性肺損傷組(ALI組):制作急性肺損傷模型成功后給予常規(guī)機(jī)械通氣8小時(shí)。③汽化吸入PFC組(PFC組):靜脈注射與LPS相同劑量的生理鹽水,在常規(guī)機(jī)械通氣基礎(chǔ)上,經(jīng)呼吸機(jī)吸氣管路以濕化器加熱PFC的方法
3、給予汽化吸入PFC治療2小時(shí),然后繼續(xù)常規(guī)機(jī)械通氣6小時(shí)。④正常對(duì)照組(C組):靜脈注射與LPS相同劑量的生理鹽水,然后給予常規(guī)機(jī)械通氣治療8小時(shí)。試驗(yàn)期間每隔1小時(shí)抽取靜脈血2ml和動(dòng)脈血1ml,試驗(yàn)結(jié)束后左肺進(jìn)行支氣管肺泡灌洗,留取右肺組織行病理檢查和分子生物學(xué)檢測(cè)。
第一部分:觀察各組動(dòng)物呼吸動(dòng)力學(xué)、血液動(dòng)力學(xué)、血?dú)夥治龅淖兓?;分別利用光學(xué)顯微鏡和透射電鏡觀察肺組織病理變化。
第二部分:①利用ELISA、rea
4、l-timePCR和Wester-Blot技術(shù)檢測(cè)血漿、肺泡灌洗液和肺組織中SP-A、SP-B、SP-C、SP-D的表達(dá)情況;②利用real-timePCR和Wester-Blot技術(shù)檢測(cè)ErbB1、ErbB4和磷酸化ErbB1在肺組織中的表達(dá)情況。
第三部分:利用ELISA和real-timePCR技術(shù)檢測(cè)MMP-2、MMP-9及其抑制劑TIMP-1、TIMP-2在血漿、肺泡灌洗液和肺組織中表達(dá)情況。
結(jié)果:
5、> 1、ALI+PFC組較ALI組氧合指數(shù)升高,氣道阻力和病理?yè)p傷評(píng)分降低。PFC組較C組病理?yè)p傷評(píng)分降低。
2、①與ALI組比較,ALI+PFC組血漿中表面活性蛋白含量下降,肺泡灌洗液中SP-A、SP-B、SP-C含量增加,肺組織中SP-A、SP-B、SP-CmRNA表達(dá)增強(qiáng)。②與ALI組比較,ALI+PFC組肺組織中ErbB1和ErbB4mRNA表達(dá)減弱;與C組比較,PFC組肺組織中ErbB1和ErbB4mRNA表達(dá)增強(qiáng)
6、。
3、與ALI組比較,ALI+PFC組血漿和肺泡灌洗液MMP-2、MMP-9的含量以及MMP-2/TIMP-2和MMP-9/TIMP-1降低,肺組織中MMP-2、MMP-9mRNA表達(dá)減弱。與C組比較,PFC組血漿中MMP-2、MMP-9的含量以及血漿和肺泡灌洗液中MMP-2/TIMP-2和MMP-9/TIMP-1降低。
結(jié)論:
1、汽化吸入PFC改善肺損傷可能與促進(jìn)SP-A、SP-B、SP-C的合成與分
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