內(nèi)毒素對牙齦成纖維細胞分泌基質(zhì)金屬蛋白酶的影響.pdf

1、河北醫(yī)科大學碩士學位論文內(nèi)毒素對牙齦成纖維細胞分泌基質(zhì)金屬蛋白酶的影響姓名：于艷玲申請學位級別：碩士專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學指導教師：許麗華楊冬茹20090301中文摘要液，每孔200ul均勻接種于96孔板，用不同濃度的內(nèi)毒素(O1u#ml，lug／ml，10u∥ml，100u#mlLPS)刺激牙齦成纖維細胞，運用MTT比色檢測牙齦成纖維細胞在不同濃度內(nèi)毒素刺激下的相對增殖率和生長抑制率，從而觀察內(nèi)毒素對牙齦成纖維細胞在生長及增殖活性方面的影

2、響。324孔板內(nèi)以每孔2104的細胞密度將第四代牙齦成纖維細胞接種于蓋玻片上，24h細胞貼壁后棄原培養(yǎng)液用2％DMEM培養(yǎng)液靜息24h，實驗組換含10u∥mlLPS的2％DMEM培養(yǎng)，對照組則不加內(nèi)毒素刺激只用2％DMEM培養(yǎng)，然后分別在不同的時間段(Oh、4h、8h、12h、24h)收集牙齦成纖維細胞的細胞爬片，冰丙酮固定，運用細胞免疫組織化學染色方法SP法檢測基質(zhì)金屬蛋白酶1和3(MMP1，3)在HGFs中表達的量，從而觀察內(nèi)毒素對

3、牙齦成纖維細胞分泌基質(zhì)金屬蛋白酶的影響。結果：1細胞免疫組織化學染色結果顯示：體外培養(yǎng)的牙齦成纖維細胞均為抗波形絲蛋白染色陽性，陽性部位位于胞漿；抗角蛋白陰性，證實細胞來源于中胚層，符合牙齦成纖維細胞的生物學特征。第四代牙齦成纖維細胞運用MTT法繪制生長曲線結果顯示：牙齦成纖維細胞的生長曲線呈典型的“S”形，經(jīng)歷了潛伏期、對數(shù)生長期和平臺期三個生長階段。2不同濃度內(nèi)毒素刺激牙齦成纖維細胞MTT結果顯示：與陰性對照組相比，第一天O1u∥m