血管緊張素Ⅱ和氧化低密度脂蛋白對(duì)人單核細(xì)胞Toll樣受體4表達(dá)的影響.pdf

1、　　目的：通過(guò)研究不同濃度的血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngII)、氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)對(duì)體外培養(yǎng)的的人單核細(xì)胞Toll樣受體4(toll-like receptor 4,TLR4)表達(dá)的影響,來(lái)探討AngII、ox-LDL促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的潛在因素,并期望為動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)的治療找到新靶點(diǎn)。
　　方法

2、：(1)MTT法檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組給予不同濃度藥物刺激后細(xì)胞增殖的情況；(2)分組：正常對(duì)照組、AngII作用組(10-10、10-8、10-6M)、ox-LDL作用組(20、40、60μg/ml)、AngII及ox-LDL聯(lián)合作用組(ox-LDL60μg/ml+AngII 10-10、10-8、10-6M)、陽(yáng)性對(duì)照組(LPS組)；(3)Real time PCR檢測(cè)TLR4 mRNA表達(dá)；(4)FCM檢測(cè)細(xì)胞膜受體TLR4蛋白的表達(dá)；(5

3、)ELISA檢測(cè)藥物刺激細(xì)胞后TNF-α和NF-κB水平。
　　結(jié)果：(1)MTT結(jié)果顯示：AngII組均能促進(jìn)細(xì)胞增殖,其中以10-10M促增殖作用最顯著(P<0.05)；低濃度ox-LDL(20、40、60μg/ml)促進(jìn)細(xì)胞增殖,高濃度ox-LDL (100μg/ml)則抑制細(xì)胞增殖(P<0.05)；兩者聯(lián)用對(duì)細(xì)胞的促增殖作用強(qiáng)于單用AngII (P<0.05)；(2) Real time PCR和FCM結(jié)果顯示：AngI

4、I、ox-LDL均能上調(diào)TLR4的表達(dá),且與濃度呈正相關(guān)(P<0.05)；兩者聯(lián)用的上調(diào)作用強(qiáng)于單用AngII(P<0.05)；(3) AngII、ox-LDL均能使NF-κB、TNF-α的含量增加,且與濃度呈正相關(guān)(P<0.05)；兩者聯(lián)用后的作用強(qiáng)于單用AngII(P<0.05)。
　　結(jié)論：AngII、ox-LDL可能是通過(guò)促進(jìn)人單核細(xì)胞膜受體TLR4的表達(dá),進(jìn)而激活NF-κB的活化,最終引起經(jīng)典炎性因子TNF-α水平的增