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文檔簡介
1、肝衰竭是由多種因素引起的嚴(yán)重肝臟損害,患者容易引起敗血癥休克和多臟器功能衰竭,其作用機(jī)制復(fù)雜,其中各種炎性細(xì)胞因子在肝衰竭的發(fā)生發(fā)展中起到重要作用。目前對(duì)于炎性細(xì)胞因子如何導(dǎo)致肝衰竭的機(jī)制并不十分清楚。Toll樣受體(Toll-likereceptors,TLRs)作為新近免疫研究的熱點(diǎn),在肝衰竭過程中的作用日益受到重視。 TLRs是一種重要的模式識(shí)別受體,主要表達(dá)于免疫細(xì)胞尤其是單核巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞表面,與相應(yīng)配體結(jié)合后可
2、以激活免疫細(xì)胞并促進(jìn)免疫細(xì)胞分泌大量的炎性細(xì)胞因子和趨化因子,發(fā)揮機(jī)體的抗感染能力,構(gòu)成機(jī)體免疫反應(yīng)的第一道防線。最新研究表明,TLRs廣泛參與肝臟針對(duì)細(xì)菌和病毒防御的免疫反應(yīng),并在眾多的肝臟疾病如肝硬化、肝再生、肝臟缺血再灌注損傷、酒精性肝病、非酒精性脂肪肝、乙型肝炎和丙型肝炎病毒感染、原發(fā)性膽汁性肝硬化中發(fā)揮作用。但是,有關(guān)TLRs在肝衰竭中的作用機(jī)制并不清楚。研究與炎性細(xì)胞因子密切相關(guān)的Toll樣受體2、4在肝衰竭中的作用和表達(dá),
3、將有助于了解肝衰竭的發(fā)病機(jī)制。 一、目的 研究肝衰竭患者外周血單核細(xì)胞Toll樣受體2、4基因的表達(dá)及其與細(xì)胞因子的關(guān)系,探討Toll樣受體2、4在肝衰竭中的作用。 二、方法 32例肝衰竭患者來自2007年6月1日至2007年12月30日浙江省臺(tái)州醫(yī)院感染科住院患者,均為乙型肝炎病毒感染。所有病例均排除近期感染以及合并其它慢性疾病者。32例均為慢加急性肝衰竭患者,其中,肝衰竭早期患者18例,中晚期患者14
4、例。另選20例健康獻(xiàn)血者為正常對(duì)照組,20例慢性乙肝患者為慢性乙肝組。采用Ficoll淋巴細(xì)胞分離液分離外周血單個(gè)核細(xì)胞,Trizol試劑抽提總RNA,反轉(zhuǎn)錄后進(jìn)行PCR擴(kuò)增,所得的產(chǎn)物經(jīng)凝膠成像分析,獲取TLR2、4mRNA光密度值。采用酶聯(lián)免疫吸附試劑檢測外周血內(nèi)毒素、TNF-α、IL-6水平,分析它們的變化及相互關(guān)系。采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包分析和處理實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)。 三、結(jié)果 正常對(duì)照組、慢性乙肝組、肝衰竭
5、早期組和中晚期組血漿內(nèi)毒素水平分別為0.05±0.01、0.11±0.04、0.21±0.08、0.30±0.11EU/ml,呈逐漸遞增趨勢,各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。正常對(duì)照組、慢性乙肝組、肝衰竭早期組和中晚期組血清TNF-α水平分別為38.56±7.68、51.92±12.37、102.48±18.25、148.52±26.38pg/ml,TNF-α水平逐漸上升,各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。正常對(duì)照
6、組、慢性乙肝組、肝衰竭早期組和中晚期組血清IL-6水平分別為7.09±1.15、13.24±3.75、19.58±5.36、24.62±9.27pg/ml,IL-6水平逐漸上升,各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。正常對(duì)照組、慢性乙肝組、肝衰竭早期組和中晚期組外周血單核細(xì)胞TLR2mRNA水平分別為0.502±0.089、0.644±0.105、0.745±0.126、0.905±0.168,TLR2的表達(dá)逐漸增強(qiáng),各組間比較差
7、異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。正常對(duì)照組、慢性乙肝組、肝衰竭早期組和中晚期組外周血單核細(xì)胞TLR4mRNA水平分別為0.512±0.092、0.685±0.135、0.946±0.176、0.826±0.156,肝衰竭早期組、中晚期組TLR4mRNA的表達(dá)要高于正常對(duì)照組(P<0.01),但相對(duì)于早期組,中晚期組TLR4mRNA的表達(dá)下降(P<0.05)。 肝衰竭早期組和中晚期組患者外周血單核細(xì)胞TLR2mRNA表達(dá)與同組血T
8、NF-α水平有明顯相關(guān)性(分別r=0.865,P<0.01:r=0.921,P<0.01),與同組血IL-6水平也有明顯相關(guān)性(分別r=0.762,P<0.01;r=0.851,P<0.01)。肝衰竭早期組患者外周血單核細(xì)胞TLR4mRNA表達(dá)與血TNF-α、IL-6水平有明顯相關(guān)性(分別r=0.917,P<0.01;r=0.788,P<0.01),但在中晚期組與血TNF-α、IL-6水平無明顯相關(guān)性(分別r=0.253,P>0.05;
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