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1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文杏花雨注射液的體外抗腫瘤作用及作用機(jī)制研究姓名:彭悅穎申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):藥理學(xué)指導(dǎo)教師:張永健20090301中文摘要法測(cè)定含藥血清對(duì)人乳腺癌細(xì)胞MCF7/S生長(zhǎng)的影響:MCF7/S細(xì)胞分為ADM對(duì)照組、含藥血清組、正常大鼠血清對(duì)照組,每組設(shè)6個(gè)平行復(fù)孔,分別加入ADM41tg/ml、5%的含藥血清、10%的含藥血清、15%的含藥血清、正常的SD大鼠血清。3d后,用Fluostar在檢測(cè)波長(zhǎng)570nm條件下
2、測(cè)定OD值,計(jì)算藥物對(duì)細(xì)胞的抑制率。(4)杏花雨注射液逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞耐藥的研究:MTT法檢測(cè)杏花雨注射液的細(xì)胞藥敏性和耐藥倍數(shù),確定生長(zhǎng)率95%的藥物濃度為非細(xì)胞毒性濃度,生長(zhǎng)率85‰90%的藥物濃度為低細(xì)胞毒性濃度。同時(shí)計(jì)算IC50。耐藥倍數(shù)=耐藥細(xì)胞的IC50/敏感細(xì)胞的IC50。MTT法檢測(cè)細(xì)胞藥敏性和耐藥性的逆轉(zhuǎn):實(shí)驗(yàn)分四組:①不同濃度的ADM單獨(dú)作用于敏感細(xì)胞;②不同濃度的ADM單獨(dú)作用于耐藥細(xì)胞;③不同濃度的ADM與非細(xì)胞毒性
3、濃度的杏花雨注射液作用于耐藥細(xì)胞;④不同濃度的ADM與低細(xì)胞毒性濃度的杏花雨注射液作用于耐藥細(xì)胞。同前方法測(cè)定各孔OD值,計(jì)算各組IC50,求出各組耐藥細(xì)胞的逆轉(zhuǎn)倍數(shù)。激光共聚焦顯微鏡觀察:對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞接種于24孔板,每孔lml。次日,給藥組分別加入非細(xì)胞毒性濃度的杏花雨注射液ADM和低細(xì)胞毒性濃度的杏花雨注射液ADM,對(duì)照組加入RPMIl640培養(yǎng)液ADM。24h后棄上清,PBS洗一次,激光共聚焦顯微鏡下觀察并定量。(5)杏花雨注射
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