NF-κB信號通路對大鼠再生肝的肝細胞增殖的促進作用研究.pdf

1、肝臟有重要的生理功能和很強的再生能力。在物理、化學、生物等因素誘導下，殘肝細胞進行增生以補償丟失的肝組織和恢復肝臟的生物學功能，此過程稱為肝再生(liver regeneration，LR)。研究表明，肝再生涉及細胞激活、去分化、細胞增殖及調(diào)控、再分化、組織結(jié)構(gòu)和功能重建等生理活動，以及組織和細胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)的一系列變化。另一方面，核因子κB(nuclear factorκB，NF-κB)信號通路參與調(diào)節(jié)免疫反應、炎癥反應、細胞增殖、細胞

2、發(fā)育等重要生理活動相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄。為了從基因組轉(zhuǎn)錄水平了解其在大鼠肝再生中對肝細胞增殖的調(diào)控作用。本文用大鼠全基因組表達譜芯片RatGenome2302.O檢測NF-κB信號通路、細胞增殖、NF-κB信號通路調(diào)節(jié)的細胞增殖相關(guān)基因，用RT-PCR確證芯片檢測結(jié)果的可靠性。研究表明，NF-κB信號通路、細胞增殖和NF-κB信號通路調(diào)節(jié)的細胞增殖活動分別包含238、1680和121個基因，Rat Genome2302.0芯片含其中的197、

3、1314和118個，大鼠再生肝中的有意義表達基因個數(shù)分別是79、423和56，肝細胞中的有意義表達基因數(shù)分別是83、484和58個。另外，用BLAST軟件分析Affymetrix芯片上未知的肝再生相關(guān)基因同源性發(fā)現(xiàn)，大鼠再生肝中NF-κB信號通路、細胞增殖、NF-κB信號通路調(diào)節(jié)的細胞增殖相關(guān)基因的同源新基因分別有19、86和6個。肝細胞中的同源新基因分別有21、104和11個。然后，用譜函數(shù)(Et)計算相關(guān)基因的表達變化及它們預示的細

4、胞增殖活動表叫，在大鼠再生肝中，途徑1、12和13在大鼠肝再生起始和進展階段以及途徑5和6在進展階段的信號傳導活動增強；細胞增殖和NF-κB信號通路調(diào)節(jié)的細胞增殖相關(guān)活動亦在起始和進展階段增強，并與信號傳導活動正相關(guān)。在肝細胞中，途徑1在起始和進展階段、途徑12在整個大鼠肝再生、途徑13在進展和終止階段的信號傳導活動增強；而肝細胞增殖和NF-κB信號通路調(diào)節(jié)的肝細胞增殖活動在整個肝再生中都顯著性地增強，且同樣與其信號傳導活動呈現(xiàn)正相關(guān)。

5、最后，本文又用T檢驗(T-Statistic)方法挖掘關(guān)鍵基因和Pathway Studio7.0軟件分析其關(guān)鍵基因的作用機理表明，在大鼠再生肝中，途徑1通過關(guān)鍵基因Tnfrsf12a、途徑5和6通過關(guān)鍵基因Lbp、途徑12通過起關(guān)鍵作用的Rras2的同源基因AI548708和途徑13通過關(guān)鍵基因Cxcl16、Fgr、Cxcr4增強NF-κB活性，提高關(guān)鍵基因Jun、Myc、Ldha、Bc13和其他相關(guān)基因的表達，促進細胞增殖。在肝細胞