氨基多糖納米微粒對人肺細(xì)胞癌轉(zhuǎn)移的影響和機(jī)理研究.pdf

1、腫瘤轉(zhuǎn)移是癌癥患者死亡的重要原因每年有90％的癌癥患者因腫瘤轉(zhuǎn)移而死亡。所以研發(fā)抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物是當(dāng)今藥物研究的重點。肝素酶是一種糖苷酶，在腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用，并且肝秦酶還可促進(jìn)腫瘤血管增生。因而肝素酶是今后藥物研發(fā)的重要靶點。氨基多糖是一種陽離子天然多糖，因其一系列獨特的特性而被關(guān)注，例如低毒副作用、可降解性、低免疫原性和生物相容性等。本課題組在前期的研究中發(fā)現(xiàn)氨基多糖納米微粒具有一定的抗腫瘤作用，并且具有易吸收，低毒副作

2、用的特點，可抑制裸鼠肝癌移植瘤血管增生，因而氨基多糖納米微粒能在癌癥治療中發(fā)揮重要作用。
　　 本研究對氨基多糖納米微粒抑制人肺細(xì)胞癌轉(zhuǎn)移的效果和機(jī)理作了初步的探索研究，通過體外細(xì)胞遷移試驗和裸鼠移植瘤模型，為今后在臨床上應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　 主要研究結(jié)果如下：
　　 1.用原子力顯微鏡，Zeta電位儀和粒徑儀分析氨基多糖納米微粒的表征，經(jīng)檢測氨基多糖納米微粒呈正電，Zeta電位范圍35.5-66.59mv，

3、平均51.32mv，粒徑分布于51.68-73.21nm平均61.83nm。將氨基多糖納米微粒應(yīng)用于Transwell細(xì)胞遷移檢測板后，氨基多糖濃度分別為0μg/ml(空白對照組)，30μg/ml，60μg/ml，90μg/ml，150μg/ml，200μg/ml時，趨化細(xì)胞平均數(shù)分別是92.80±2.387，74.60±1.600，63.80±1.014，50.20±2.817，41.40±3.414，38.80±1.114，且均差異

4、顯著(P<0.05)。顯示氨基多糖納米微粒在體外抑制人肺癌SPC-A-1細(xì)胞遷移呈量效關(guān)系。
　　 2.裸鼠人肺癌SPC-A-1移植瘤實驗結(jié)果顯示，在實驗的28d后，與對照組相比，口服氨基多糖納米微粒的灌胃30mg/kg.w組，灌胃60mg/kg.w組，灌胃90mg/kg.w組相對腫瘤增殖率T/C分別為59.4％，38.6％和47.7％，順鉑組為32.2％，均對裸小鼠移植瘤的生長有明顯的抑制作用(P<0.05)。光鏡檢查肺，肝，

5、脾和腎形態(tài)組織發(fā)現(xiàn)，改善因為腫瘤生長而引起的肺、肝、脾和腎組織損傷，氨基多糖納米微粒能有效抑制腫瘤轉(zhuǎn)移到肺。電鏡觀察氨基多糖納米徼?？捎行茐姆伟┘?xì)胞結(jié)構(gòu)。
　　 3.裸鼠血液中肝素酶，細(xì)胞侵襲酶尿激酶，TNF-α，IL-1β酶活和分泌量檢測，移植瘤中肝素酶和尿激酶，脾臟組織中TNT-α和IL-1βmRNA豐度研究結(jié)果顯示，與對照組相比，灌胃30mg/kg.w組，灌胃60mg/kg.w組，灌胃90mg/kg.w組和順鉑組均能抑制

6、肝素酶活和表達(dá)，酶活分別是對照組的80.0％(P>0.05)，63.3％(P<0.05)，76.8％(P>0.05)，59.7％(P<0.05)，表達(dá)分別是對照組的94.8％(P>0.05)，59.9％(P<0.05)，68.8％(P<0.05)，52.4％(P<0.05)。但3個試驗組對肝素酶的酶活和表達(dá)抑制呈雙相性，即出現(xiàn)灌胃60mg/kg.w組最好情況。灌胃30mg/kg.w組，灌胃60mg/kg.w組，灌胃90mg/kg.w組均

7、可促進(jìn)TNF-α分泌量，分別是對照組的115.9％(P<0.01)，153.4％(P<0.01)，122.1％(P<0.01)，表達(dá)分別是對照組的103.1％(P>0.05)，197.5％(P<0.01)，113.6％(P>0.05)。順鉑抑制TNF-α分泌量和表達(dá)，分別是對照組的87.1％(P>0.05)，52.3％(P<0.05)。灌胃30mg/kg.w組，灌胃60mg/kg.w組，灌胃90mg/kg.w組均可促進(jìn)IL-1β分泌量與

8、對照組相比為107.1％(P>0.05)，194.0％(P<0.01)，120.4％(P>0.05)，表達(dá)分別為101.9％(P>0.05)，130.9％(P<0.01)，135.5％(P<0.01)。順鉑抑制IL-1β分泌和表達(dá)與對照組相比分別為92.8％(P>0.05)，42.4％(P<0.01)。灌胃30mg/kg.w組，灌胃60mg/kg.w組，灌胃90mg/kg.w組對尿激酶酶活增強作與對照組相比為113.2％(P<0.05)

9、，133.3％(P<0.05)，107.5％(P<0.05)，表達(dá)為為166.1％(P<0.05)，171.2％(P<0.05)，139.4％(P>0.05)。而順鉑組抑制尿激酶活性和表達(dá)，活性與對照組相比為99.11％(P>0.05)。表達(dá)與對照組相比為87.0％(P>0.05)。雙相性可能是由激活尿激酶活性造成的，因為激活尿激酶可促進(jìn)TNF-α和IL-1β表達(dá)，而這兩者可促進(jìn)肝素酶分泌。從順鉑抑制尿激酶活性抑制TNF-α和IL-1β