靶向抑制滑膜細(xì)胞TNF-α基因表達(dá)的siRNA篩選及鑒定.pdf

1、目的:設(shè)計(jì)并篩選能高效抑制創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞腫瘤壞死因子α（Tumor Necrosis Factor-α，TNF-α）表達(dá)的最佳干擾序列，為進(jìn)一步研究TNF-α基因?qū)?chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎的臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。
　　方法:根據(jù)人源TNF-α mRNA的序列，設(shè)計(jì)合成3對(duì)不同的且能干擾TNF-α基因表達(dá)的小型干擾RNA(small interfering RNA，siRNA)序列，將其轉(zhuǎn)染人創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞，培養(yǎng)48h后，采用RT-PC

2、R方法檢測(cè)細(xì)胞上清液中TNF-α mRNA表達(dá)水平，采用ELISA方法檢測(cè)細(xì)胞上清液TNF-α表達(dá)水平。
　　結(jié)果:與對(duì)照組相比，3對(duì)siRNA中有2對(duì)siRNA可有效使人滑膜細(xì)胞中TNF-α mRNA表達(dá)減少(P＜0.01)，同時(shí)細(xì)胞上清液中TNF-α分泌量下降，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　結(jié)論:成功設(shè)計(jì)合成了靶向TNF-α基因的siRNA，并從中篩選出能特異且高效阻斷TNF-α表達(dá)的siRNA，為