秦川牛心肌細胞色素C和輔酶Q-,10-提取純化及檢測的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究以秦川牛心肌為材料,采用酸化水提取,人造沸石吸附,硫酸銨鹽析,三氯乙酸沉淀,透析及過濾后測定其細胞色素C含量。用D-85離子交換樹脂在層析柱內純化后,測定細胞色素C中含鐵量、酶活力,并用電泳鑒定其純度。利用提取細胞色素C后的牛心肌渣,采用醇堿皂化、石油醚萃取,濃縮后低溫放置除去膽固醇等雜質,上硅膠柱,收集黃色油狀物,無水乙醇結晶后得到精品CoQ10。用薄層層析,對照Rf值進行定性鑒定,用紫外分光光度計在275nm下測定其純度。對提

2、取純化產品進行分析,取得了以下主要結果: (1)研究分析表明,提取純化細胞色素C工藝合理,樣品定性鑒別正常,電泳分析為一條譜帶。樣品與標準品在紫外分光光度上掃描,紫外吸收光譜相同,在520nm和550nm處有最大吸收峰。 (2)細胞色素C樣品經(jīng)比色定量測定平均收率為146.3mg/kg,高于國內文獻報導。純化后樣品鐵含量平均為0.42﹪,酶活力平均為96.2﹪,符合中國藥典規(guī)定。 (3)從牛心肌渣中制備CoQ10

3、,經(jīng)研究醇堿皂化適宜溫度為90℃,皂化時間為30min,萃取2次。經(jīng)薄層層析,僅有一個斑點,Rf=0.56(a=7.5cm,c=13.5cm)。樣品與標準CoQ10在紫外光度計掃描,紫外吸收光譜相同,在275nm處有最大吸收峰,定量測定樣品的純度為91.2﹪。 (4)根據(jù)牛心肌生理特征,采用較常規(guī)方法低的pH3.4酸化水,有利于提取細胞色素C。用國產D-85大孔弱酸性陽離子交換樹脂替代常用的美國AmberliteIRC-50交換

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