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文檔簡介
1、目的: 1.探討乳鼠中腦黑質(zhì)器官型腦片的培養(yǎng)方法。 2.證實(shí)乳鼠中腦黑質(zhì)器官型腦片培養(yǎng)是研究帕金森病病因和機(jī)制的良好方法。 3.探討輔酶Q10對離體帕金森模型的黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的作用及其機(jī)制,為Parkinson病的治療提供幫助。 方法: 1.選SD乳鼠,制備中腦黑質(zhì)器官型腦片(厚度350μm)。用Millicell-CM微孔膜腦片離體培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)腦片,光鏡觀察,TH免疫組化反應(yīng)染色,并與同齡S
2、D乳鼠作形態(tài)學(xué)及TH陽性反應(yīng)細(xì)胞計數(shù)比較。 2.12只SD乳鼠分成4組,每只乳鼠切取4張腦片,腦片分別于對照組、含MPF+、CoQ10及Mpp++CoQ10的培養(yǎng)液中共孵育48h。 3.用抗酪氨酸羥化酶免疫組織化學(xué)方法觀測黑質(zhì)陽性細(xì)胞體及突起的變化。 結(jié)果: 1.培養(yǎng)0~14d內(nèi)器官型腦片黑質(zhì)細(xì)胞的體積及細(xì)胞密集程度均小于同期在體發(fā)育的黑質(zhì)結(jié)構(gòu);離體培養(yǎng)與同期在體發(fā)育的黑質(zhì)結(jié)構(gòu)比較,TH陽性細(xì)胞相對幼稚,
3、細(xì)胞間連接出現(xiàn)較晚,兩者TH陽性細(xì)胞計數(shù)存在統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 2.在MPP+作用下,黑質(zhì)器官型腦片邊緣較模糊,細(xì)胞結(jié)構(gòu)欠清,細(xì)胞密度較正常對照組?。籘H陽性細(xì)胞突起斷裂或消失、數(shù)量明顯減少,與對照組比較TH陽性細(xì)胞數(shù)無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),有突起的陽性細(xì)胞的比例與對照組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 3.CoQ10單獨(dú)不影響多巴胺能神經(jīng)元,CoQ10+MPP+組TH陽性細(xì)胞形態(tài)完整,突起明顯,多而長
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