輔酶Q-,10-對黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的早期作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的： 1．探討乳鼠中腦黑質(zhì)器官型腦片的培養(yǎng)方法。 2．證實(shí)乳鼠中腦黑質(zhì)器官型腦片培養(yǎng)是研究帕金森病病因和機(jī)制的良好方法。 3．探討輔酶Q10對離體帕金森模型的黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的作用及其機(jī)制，為Parkinson病的治療提供幫助。 方法： 1．選SD乳鼠，制備中腦黑質(zhì)器官型腦片(厚度350μm)。用Millicell-CM微孔膜腦片離體培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)腦片，光鏡觀察，TH免疫組化反應(yīng)染色，并與同齡S

2、D乳鼠作形態(tài)學(xué)及TH陽性反應(yīng)細(xì)胞計數(shù)比較。 2．12只SD乳鼠分成4組，每只乳鼠切取4張腦片，腦片分別于對照組、含MPF+、CoQ10及Mpp++CoQ10的培養(yǎng)液中共孵育48h。 3．用抗酪氨酸羥化酶免疫組織化學(xué)方法觀測黑質(zhì)陽性細(xì)胞體及突起的變化。 結(jié)果： 1．培養(yǎng)0～14d內(nèi)器官型腦片黑質(zhì)細(xì)胞的體積及細(xì)胞密集程度均小于同期在體發(fā)育的黑質(zhì)結(jié)構(gòu)；離體培養(yǎng)與同期在體發(fā)育的黑質(zhì)結(jié)構(gòu)比較，TH陽性細(xì)胞相對幼稚，

3、細(xì)胞間連接出現(xiàn)較晚，兩者TH陽性細(xì)胞計數(shù)存在統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 2．在MPP+作用下，黑質(zhì)器官型腦片邊緣較模糊，細(xì)胞結(jié)構(gòu)欠清，細(xì)胞密度較正常對照組?。籘H陽性細(xì)胞突起斷裂或消失、數(shù)量明顯減少，與對照組比較TH陽性細(xì)胞數(shù)無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，有突起的陽性細(xì)胞的比例與對照組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 3．CoQ10單獨(dú)不影響多巴胺能神經(jīng)元，CoQ10+MPP+組TH陽性細(xì)胞形態(tài)完整，突起明顯，多而長