川芎嗪對(duì)哮喘小鼠CD4+CD25+Treg細(xì)胞的調(diào)控作用及Th1-Th2平衡的影響.pdf

1、目的：通過(guò)研究川芎嗪對(duì)哮喘模型小鼠外周血CD4+CD25+Treg細(xì)胞、及Th1細(xì)胞Th2細(xì)胞所分泌的特征性細(xì)胞因子IFN-γ、IL-4水平的影響，來(lái)探討川芎嗪在支氣管哮喘治療中的作用機(jī)制。
　　 方法：健康雌性BALB/c純系小鼠（徐州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供）30只，6-8周齡，雌性，體重22-24g，普通級(jí)，按隨機(jī)數(shù)字表法分為3組（每組10只）：(1)哮喘組及治療組：均于第0、7、14天予OVA/Al(OH)3混合液0.1m

2、l(內(nèi)含OVA20μg，Al(OH)31mg)腹腔(intraperitoneal，I．P)注射，第21-26天每天將小鼠置于5L密閉容器中以2％的OVA生理鹽水(NS，normal saline)溶液10ml霧化吸入激發(fā)30min或出現(xiàn)哮喘樣發(fā)作為止。另外，治療組于第0、1、7天及每次霧化前30min腹腔(I．P．)注射川芎嗪80mg/kg。(2)對(duì)照組則以生理鹽水(NS)在致敏階段替代OVA腹腔注射，以生理鹽水(NS)在激發(fā)階段替代

3、OVA霧化。各組于最后一次激發(fā)后24h，即第27天處死動(dòng)物進(jìn)行各項(xiàng)檢測(cè)。觀察小鼠肺組織病理改變，流式細(xì)胞儀檢測(cè)外周血CD4+CD25+Treg細(xì)胞百分比及占CD4+T細(xì)胞的比例，ELISA方法檢測(cè)血清中IFN-γ和IL-4的含量變化。
　　 結(jié)果：(1)小鼠臨床表現(xiàn)及肺組織病理改變：哮喘模型組小鼠出現(xiàn)了煩躁不安，頭面部抓撓，鼻扇，偶爾咳嗽，呼吸急促，前肢縮抬，反應(yīng)遲鈍，步態(tài)不穩(wěn)，蛙跳等典型哮喘表現(xiàn)，嚴(yán)重者呼吸減慢或呼吸節(jié)律不整，

4、口鼻輕度紫紺，四肢癱軟，行動(dòng)遲滯或俯伏不動(dòng)；連續(xù)激發(fā)后小鼠毛色失去光澤，反應(yīng)遲鈍，取出動(dòng)物后可見遺留較多排泄物。治療組小鼠癥狀表現(xiàn)較輕，24小時(shí)內(nèi)精神，毛發(fā)，食欲均可獲得不同程度上的恢復(fù)；對(duì)照組小鼠一般情況良好。光鏡下，模型組小鼠肺泡間隔增寬，支氣管管腔變小，管壁增厚，小血管及細(xì)支氣管周圍可見到大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)；川芎嗪干預(yù)組病理改變較模型組輕；對(duì)照組小鼠細(xì)支氣管及肺泡結(jié)構(gòu)正常，無(wú)明顯炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。(2)小鼠外周血CD4+CD25+Tre

5、g細(xì)胞的百分率、占CD4+T細(xì)胞比例：模型組（3.26±0.61％、16.82±0.89％）明顯低于正常對(duì)照組（5.34±0.78％、18.90±1.74％），均為P＜0.01；川芎嗪治療組（4.22±0.70％、18.56±1.67％）比模型組增高，均為P＜0.01。(3)小鼠血清IFN-γ、IL-4水平及IFN-γ/IL-4;血清IFN-γ水平模型組較對(duì)照組明顯降低（49.02±7.13pg/ml vs117.96±9.62pg/m

6、l，P＜0.01），川芎嗪治療組較模型組升高（96.00±3.64pg/ml vs49.02±7.13pg/ml，P＜0.01）；血清IL-4水平模型組明顯高于對(duì)照組（55.06±7.63pg/mlvs31.09±5.12pg/ml，P＜0.01），治療組較模型組明顯降低（42.13±5.83pg/mlvs55.06±7.63pg/ml，P＜0.01）；血清IFN-γ/IL-4水平模型組較對(duì)照組明顯降低（0.91±0.19vs3.86±