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文檔簡介
1、乳鐵蛋白是一種分子質(zhì)量約80kD的鐵結(jié)合性糖蛋白,隸屬于轉(zhuǎn)鐵蛋白家族,具有廣泛的生物學(xué)和生理特性的功能。本課題的研究目的包括兩個(gè)方面:其一是機(jī)體免疫低下狀態(tài)下,乳鐵蛋白及其胃蛋白酶水解產(chǎn)物對外周血中Th1/Th2細(xì)胞平衡的影響;其二是乳鐵蛋白對食物過敏機(jī)體外周血中Th1/Th2細(xì)胞平衡的影響。
對BALB/c小鼠一次性腹腔注射80mg/kg·body weight(BW)的環(huán)磷酰胺,建立免疫低下小鼠模型,檢測其脾臟指數(shù)、胸
2、腺指數(shù)和外周血部分細(xì)胞因子(IL-4、IL-6、IL-10、IL-12p40、IFN-γ、TGF-β)等相關(guān)指標(biāo)。對免疫低下小鼠灌胃不同劑量(2、20、200mg/kg·BW)的乳鐵蛋白及其水解產(chǎn)物,在不同時(shí)間點(diǎn)檢測外周血中IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4比值的變化,評價(jià)其對Th1/Th2細(xì)胞平衡的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,小鼠在第3天達(dá)到了免疫最低下狀態(tài),且Th1/Th2細(xì)胞平衡偏向了Th2細(xì)胞。20mg/kg·BW的乳鐵蛋白及2
3、mg/kg·BW的乳鐵蛋白水解產(chǎn)物在前2小時(shí)明顯提高了IFN-γ含量及IFN-γ//IL-4比值。乳鐵蛋白對IL-4的影響較小(P>0.05),而其水解產(chǎn)物只在第3小時(shí)顯著降低了IL-4的含量(P≤0.05)。因此,乳鐵蛋白及其胃蛋白酶水解產(chǎn)物對環(huán)磷酰胺誘發(fā)免疫低下小鼠具有重要的免疫調(diào)節(jié)作用,改善了Th1/Th2細(xì)胞平衡,并且對Th1細(xì)胞的影響更明顯。
利用卵清白蛋白(Ovalbumin,OVA)建立BALB/c小鼠食物過
4、敏模型,觀察乳鐵蛋白對該食物過敏機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)作用。食物過敏小鼠分別接受預(yù)防性乳鐵蛋白處理和胃腸道刺激期間灌胃乳鐵蛋白,最后一次處理1h后檢測其外周血中IFN-γ、IL-4、TGF-β、IL-6、IL-10、IL-12p40和特異性IgE的變化,進(jìn)而評價(jià)乳鐵蛋白對Th1/Th2細(xì)胞平衡的影響。結(jié)果表明,2mg/kg·BW的乳鐵蛋白在胃腸道刺激期間顯著提高了IFN-γ和IL-12p40水平,而降低了IL-4和IL-6水平,但20mg/kg
5、·BW的乳鐵蛋白降低了所有這些細(xì)胞因子(IFN-γ含量從197.8ng/L降到162.15ng/L;IL-4含量從216.45ng/L降到148.65ng/L;IL-10含量從181.2ng/L降到151.2ng/L;TGF-p含量從221.3ng/L降到162.15ng/L;IL-12p40含量從221.2pg/L降到186.4pg/L;IL-6含量從99.6ng/L降到88.55ng/L)。同時(shí),乳鐵蛋白明顯降低了血清中特異性IgE
6、濃度而提高了IFN-γ/IL-4比值,20mg/kg·BW的乳鐵蛋白對IgE影響較大(含量從4.5μg/L降到4.0μg/L),2mg/kg·BW的乳鐵蛋白對IFN-γ/IL-4比值影響較大(比值從0.8升到1.2)。此外,預(yù)防性處理中的乳鐵蛋白均顯著降低了IL-4、IL-6、IL-10、IL-12p40、IFN-γ、TGF-β和IgE水平,明顯提高了IFN-γ/IL-4比值,并且20mg/kg·BW的乳鐵蛋白效果較好。因此,乳鐵蛋白能
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