β-arrestin-2對急性哮喘小鼠脾CD4+T細胞Th1-Th2型細胞因子分泌的影響及其機制研究.pdf

1、支氣管哮喘(Asthma)是一種以肥大細胞、嗜酸性粒細胞和T淋巴細胞氣道浸潤，以黏液高分泌、氣道高反應性和氣道重構為特征的慢性氣道炎癥性疾病。關于氣道炎癥的發(fā)生，以往的研究普遍認為主要是免疫源性炎癥，其具體機制尚有待進一步的研究。多數(shù)學者認為輔助性T淋巴細胞兩種亞型（Th1細胞和Th2細胞）的失衡是哮喘發(fā)生的重要機制，具體則表現(xiàn)為Th2細胞的活化亢進，這是哮喘發(fā)病機制中的關鍵環(huán)節(jié)。Th1、Th2細胞是由共同的前體細胞，即Th0細胞分化而

2、來，轉錄因子GATA3是Th2細胞特異性的轉錄因子，IFN-γ和IL-4則分別是Th1和Th2類細胞因子的主要代表。
　　 蛋白質是生物體內一切功能的執(zhí)行者，故研究疾病必須依賴于分析最終的功能蛋白。所以研究哮喘發(fā)病的功能蛋白對揭示哮喘的發(fā)病機制有著不可替代的作用。近年來一種蛋白逐漸進入國外諸多科學家的視野，并被視為哮喘極具前景的治療靶點—β-arrestin-2。
　　 β-arrestin-2是一種細胞內的信號調節(jié)蛋白

3、，廣泛參與G蛋白偶聯(lián)受體(G-protein coupled receptors，GPCRs)相關信號通路。近年國外多項研究發(fā)現(xiàn)β-arrestin-2在哮喘發(fā)病中發(fā)揮正向調節(jié)作用。
　　 β-arrestin-2基因敲除小鼠可能通過抑制T細胞向肺臟的趨化，抑制哮喘氣道T細胞的募集以及氣道炎癥和氣道高反應性的產(chǎn)生;肺臟基質細胞表達的β-arrestin-2基因對于哮喘氣道高反應性的形成必不可少;此外，造血干細胞來源的β-arre

4、stin-2促進哮喘氣道炎癥的形成和嗜酸性粒細胞的因子的趨化。因此，β-arrestin-2是調節(jié)哮喘發(fā)病的一個重要因子。
　　 以Th2活化亢進為特征的Th1/Th2失衡是哮喘發(fā)病的關鍵。那么，β-arrestin-2是否也可以影響T細胞細胞因子的分泌？β-arrestin-2是一種GPCR調節(jié)蛋白，多是通過調節(jié)GPCR發(fā)揮作用。T細胞表面表達一定量的β2腎上腺素受體(β2-adrenergic receptor，β2AR)，

5、β2AR是GPCR的家族成員之一。研究發(fā)現(xiàn)T細胞表面的β2AR調節(jié)哮喘患者T細胞細胞因子的分泌和趨化。而β-arrestin-2可以多途徑調控β2AR介導的信號傳導。因此，我們設想β-arrestin-2可能通過調節(jié)β2AR間接影響哮喘小鼠Th1/Th2細胞型的細胞因子分泌。
　　 RNA干擾(RNA interference，RNAi)是高度保守的基因沉默技術，它在功能上與基因敲除或基因沉默一致，但比基因敲除技術更為方便快捷。

6、在本研究中，我們利用RNA干擾技術下調急性哮喘小鼠脾CD4+T細胞的β-arrestin-2的表達，以Th1、Th2細胞特征性的細胞因子IFN-γ、IL-4和IL-5為評估的靶點，以急性哮喘小鼠脾CD4+T細胞表面的β2AR為橋梁，探討急性哮喘小鼠模型脾CD4+T細胞中β-arrestin-2對IFN-γ、IL-4和IL-5的影響以及β2AR在此過程中發(fā)揮的作用。研究的主要目的之一是探討β-arrestin-2對急性哮喘小鼠脾源性CD4