雙歧桿菌桿菌及其發(fā)酵液的抗腫瘤機制的研究.pdf

1、大連醫(yī)科大學碩士學位論文雙歧桿菌桿菌及其發(fā)酵液的抗腫瘤機制的研究姓名：張偉申請學位級別：碩士專業(yè)：病原生物學指導教師：黃敏20050601制備病理切片。將體外培養(yǎng)的H 2 2 、S 1 8 0 細胞株加入N S 、發(fā)酵液、死菌3 X 1 0 9 、活菌3 ×1 0 9 培養(yǎng)不同時間后，M T T 法計算抑瘤率。取1 2 只小鼠，荷瘤S 1 8 0 細胞株，隨機分為4 組，每組3 只，荷瘤2 4 小時后，分別給予N S 、發(fā)酵液

2、、死菌3 X 1 0 9 、活菌3 X 1 0 9 每臼一次，每次l m l ／只，腹腔注射，連續(xù)1 0 目。斷頭處死小鼠，無菌條件下制各脾細胞懸液，在一定量C o n A 下，用1 6 4 0 培養(yǎng)液于5 ％C 0 2 3 7 。C 環(huán)境中培養(yǎng)4 4 小時后取出，每孔吸出1 0 0 m 上清夜加入M T I ' ，繼續(xù)培養(yǎng)4 小時后，各孔加入1 0 ( 3 I 山酸化異丙醇，測其O D 值，計算淋巴細胞轉化率。另取死菌液加入H

3、 ：：細胞中，培養(yǎng)4 8 小時，用戊二醛固定制備電鏡標本，觀察其超微結構。研究雙歧桿菌對體外培養(yǎng)的腫瘤細胞株的抑瘤作用及機制。結果：1 ．雙歧桿菌死菌液和雙歧桿菌活菌液能夠延長荷瘤小鼠的生存期，抑制腫瘤生長，而雙歧桿菌發(fā)酵液不能延長其生存期：對由H ：：腫瘤細胞所致的腹水型荷瘤小鼠，死菌液組、活菌液組的生存期平均值分別為：2 2 ．5 0 ±2 ．7 0 d 、2 3 ．6 3 ±2 ．7 1 d 較N S 組( 1

4、 2 ．1 3 ±1 ．7 2 d ) 有顯著延長( P0 ．0 5 ) ；對由S 1 8 0 腫瘤細胞引起的腹水型荷瘤小鼠，死菌液組、活菌液組的生存期平均值分別為：2 5 ．2 5 ±3 ．4 5 d 、2 5 ．8 8 ±3 ．2 8 d 較N S 組( 1 5 ．7 5 ±1 ．6 2 d )有顯著延長( P0 ．0 5 ) 。病理切片上可見：雙歧桿菌死菌液和雙歧桿菌活菌液作用腫瘤組織后，腫

5、瘤組織內(nèi)部和間質可見大量炎性細胞浸潤，以淋巴細胞和中性粒細胞為主。2 ．雙歧桿菌死菌液和雙歧桿菌活菌液對腫瘤細胞株有抑殺作用。在M T T 法抑瘤實驗中，死菌液組對H ：：腫瘤細胞株的最高抑制率為5 0 ．1 1 ％，對S 1 8 0 腫瘤細胞株的最高抑制率為5 3 ．3 8 ％，活菌液組對H 2 2腫瘤細胞株的最高抑制率為5 7 ．3 4 ％，對S 1 8 。腫瘤細胞株的最高抑制率為5 8 ．0 4 ％，而發(fā)酵液組的腫瘤抑制率較低，分