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文檔簡介
1、目的: 優(yōu)化雙歧桿菌定植,評價雙歧桿菌抗輻射損傷的效應(yīng)和探討其拮抗機制。 方法: 1.雙歧桿菌定植條件的優(yōu)化與評價。選用SPF級C57BL小鼠,優(yōu)化雙歧桿菌菌種、灌注方式、灌腸操作和灌腸器械,應(yīng)用隱血實驗、RT-PCR檢測TLR2mRNA和HGF免疫組化評價定植條件優(yōu)化的效果。 2.雙歧桿菌抗輻射損傷的效應(yīng)。選用SPF級C57BL小鼠和雙歧桿菌菌種以及不同的照射劑量,通過觀察血液WBC總數(shù)和30d小鼠生存率評價其
2、拮抗效應(yīng)。 3.雙歧桿菌抗輻射的拮抗機制。選用SPF級C57BL小鼠,用雙歧桿菌菌懸液灌腸和<'60>Coγ射線全身照射,通過抗氧化指標(biāo)(SOD、CAT和MDA)、脊神經(jīng)組織細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)檢測、RT-PCR對脾臟組織用檢測TLR2mRNA水平的表達(dá)以及檢測腎臟bcl-2、NF-κBp65和Cytochrome C的蛋白的免疫組化,探討其拮抗途徑。 結(jié)果: 1.定植條件優(yōu)化后效果明顯,隱血試驗、RT-PCR(TLR
3、2mRNA)和免疫組化(HGF)結(jié)果顯示優(yōu)化組效果最好(P<0.05)。 2.雙歧桿菌組與輻射損傷組相比,明顯具有提高小鼠WBC最低值,延長30d存活率。 3.雙歧桿菌處理組肝組織中SOD和CAT水平明顯高于放射損傷組(P<0.01),同時MDA明顯低于放射損傷組(P<0.01);電鏡結(jié)果顯示:放射損傷組與雙歧處理組的細(xì)胞漿、細(xì)胞核和線粒體均明顯腫脹,雙歧處理組同時具有早期凋亡現(xiàn)象;RT-PCR結(jié)果顯示:雙歧處理組TLR
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