腸道病毒71型中和抗體的制備.pdf

1、腸道病毒71型(EV71)屬于人類小核糖核酸病毒科腸道病毒屬腸道病毒A種病毒，同柯薩奇病毒16型(CA16)一道，是引發(fā)手足口病(HFMD)的兩種主要病原體。雖然手足口病的臨床癥狀表現(xiàn)為輕微的發(fā)疹及發(fā)燒癥狀，但是EV71病毒的感染能夠引發(fā)嚴重的神經(jīng)疾病，如致死性腦炎，無菌性腦膜炎，急性松弛性麻痹，而CA16病毒的感染一般不會導致這些疾病。
　　EV71病毒主要感染小孩，特別是嬰幼兒，其病毒于1969年在加利福尼亞的一個患有致死性腦

2、炎的9個月大的嬰兒中第一次分離得到的。手足口病在很多國家和地區(qū)中廣泛流行著。近年來，在馬來西亞、新加坡、臺灣、日本、韓國、越南和中國大陸等東南亞和東亞的國家和地區(qū)經(jīng)常會有手足口病的大爆發(fā)。目前由于沒有合適的疫苗和抗病毒藥物，還不能治療由EV71感染導致的手足口病。在EV71感染過程中會發(fā)生依賴于抗體的病毒感染增強現(xiàn)象，這給疫苗治療制造了一些困難。抗體這種被動免疫治療的藥物，也許是治療手足口病的新希望。
　　在本實驗中我們選用EV7

3、1-HM003207病毒株，該病毒株屬于目前國內(nèi)EV71感染病例中最常見的病毒C4亞型。用EV71活病毒、VP1-GST融合蛋白以及偶聯(lián)上血藍蛋白(KLH)的SP55、SP70和VP2-28三條中和線性表位肽作為三種免疫原成分免疫BALB/C小鼠，而后雜交瘤細胞技術(shù)結(jié)合酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)，篩選到了14株強結(jié)合型單克隆抗體。在橫紋肌瘤細胞(RD)和神經(jīng)細胞(SKNSH)上檢測單克隆抗體的中和保護作用，結(jié)果顯示有四株單克隆抗體在