康氏木霉的提取及發(fā)酵條件的篩選.pdf

1、水稻秸稈資源豐富，但由于利用不當(dāng)，造成大量浪費(fèi)，引起環(huán)境污染。為了解決水稻秸稈主要組成成分難降解問(wèn)題，本論文對(duì)微生物發(fā)酵稻草進(jìn)行研究。目的在于通過(guò)對(duì)可再生資源的生物轉(zhuǎn)化利用，拓展秸稈利用途徑，在有利于生態(tài)平衡的條件下解決環(huán)境污染和資源浪費(fèi)問(wèn)題。本文對(duì)稻草秸稈微生物發(fā)酵進(jìn)行了研究，包括菌種篩選、發(fā)酵條件篩選、體內(nèi)試驗(yàn)。
　　本研究首先篩選出分解纖維素能力強(qiáng)的菌種，為后續(xù)發(fā)酵稻草打下基礎(chǔ)。樣品取自延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院牧場(chǎng)內(nèi)腐爛的稻草，經(jīng)過(guò)羧

2、甲基纖維素瓊脂培養(yǎng)基、濾紙條培養(yǎng)基初篩，得到不同的具有分解纖維素能力的菌種，根據(jù)水解圈直徑與菌落直徑比值，篩選出高效分解纖維素菌，觀察其群體形態(tài)、個(gè)體形態(tài)，并從生理生化特性方面對(duì)其進(jìn)行鑒定。經(jīng)鑒定為康氏木霉。對(duì)其最適生長(zhǎng) pH、溫度、天數(shù)進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果顯示：所篩選康氏木霉生長(zhǎng)最適 pH為5.5，最適溫度30℃，最佳生長(zhǎng)天數(shù)6天。其次，以稻草和麩皮為主要原料，通過(guò)單因素試驗(yàn)優(yōu)化康氏木霉固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的條件，對(duì)氮源、接種量、麩皮含量、含

3、水量、發(fā)酵時(shí)間、發(fā)酵溫度和初始pH值進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，最佳發(fā)酵培養(yǎng)基：氮源為（NH4）2SO4，接種量為7％，麩皮含量為40%，含水量為200%，初始pH值為5.0；最佳發(fā)酵條件：培養(yǎng)時(shí)間為96h，溫度為30℃。
　　再次，利用康氏木霉與酵母混合發(fā)酵處理稻草秸稈，證實(shí)酵母菌和康氏木霉之間不僅無(wú)拮抗，且酵母菌能促進(jìn)康氏木霉的生長(zhǎng)；單因素試驗(yàn)確定混合發(fā)酵最適發(fā)酵時(shí)間3天，最適發(fā)酵溫度為30℃，最適pH為4.5；正交試驗(yàn)得出酵母最佳

4、添加量為70%，酵母在第3天加入，尿素添加量為1%。發(fā)酵料蛋白含量可達(dá)11.21%，還原糖含量20.65%。
　　最后，選用3頭安裝永久性瘤胃瘺管的延邊黃牛，利用尼龍袋法分別對(duì)堿化、發(fā)酵、普通稻草的中性洗滌纖維（NDF）、酸性洗滌纖維（ADF）、纖維素降解率（CEL）、半纖維素降解率（HC）進(jìn)行瘤胃降解測(cè)定，試驗(yàn)采用3×3拉丁方設(shè)計(jì)。結(jié)果表明：隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，中性洗滌纖維降解率、酸性洗滌纖
　　維降解率、纖維素、半纖維素降解