桉樹開花相關(guān)基因在基因組圖譜上的定位.pdf

1、遺傳圖譜構(gòu)建是當(dāng)前植物遺傳研究的熱點(diǎn)，但林木遺傳圖譜構(gòu)建中存在密度較低、共顯性標(biāo)記不多、基于功能基因的標(biāo)記缺乏等問題，如何開發(fā)共顯性的、基于功能基因的分子標(biāo)記并用于林木遺傳圖譜構(gòu)建是急需解決的問題。桉樹在全球范圍內(nèi)是重要的造林樹種，也是林木遺傳研究的模式樹種，其遺傳圖譜構(gòu)建具有重要的理論意義和應(yīng)用價(jià)值。 利用下載的15條EST開花基因序列，進(jìn)行了引物設(shè)計(jì)和PCR擴(kuò)增條件優(yōu)化，有13對(duì)引物能成功進(jìn)行PCR擴(kuò)增。利用DGGE(Den

2、aturing gradinent electrophoresis)和33種限制性內(nèi)切酶對(duì)可成功PCR擴(kuò)增的13個(gè)EST序列在尾葉桉×細(xì)葉桉F<,1>作圖譜系的多態(tài)性進(jìn)行了篩選，分析了EST標(biāo)記的分離方式，并將多態(tài)性的EST標(biāo)記整合到尾葉桉和細(xì)葉桉的RAPD遺傳圖譜上。 分離方式研究中，有9個(gè)EST序列可用DGGE和合適的限制性內(nèi)切酶酶切并在作圖譜系中產(chǎn)生多態(tài)性，即產(chǎn)生EST標(biāo)記，9個(gè)EST標(biāo)記呈1:1的分離，包括1個(gè)偏離孟德爾

3、分離(a=0.05)，且均符合孟德爾分離。孟德爾正態(tài)分離的EST標(biāo)記比例達(dá)88.9％，偏分離標(biāo)記比例為11.1％。 在分離方式研究的基礎(chǔ)上進(jìn)行了遺傳圖譜構(gòu)建的研究，運(yùn)用作圖軟件Mapmaker3.0將EST標(biāo)記整合到已構(gòu)建的RAPD遺傳圖譜上，結(jié)果表明：6個(gè)EST標(biāo)記分別整合到尾葉桉的第3、8、10、13和15連鎖群上，總遺傳圖距1544cM，共23個(gè)連鎖群，標(biāo)記間的平均距離為10.8cM。整合8個(gè)EST標(biāo)記后的細(xì)葉桉新圖譜總遺