通過全基因組掃描研究定位小鼠性發(fā)育相關(guān)基因.pdf

1、性發(fā)育是指?jìng)€(gè)體性成熟并獲得生殖能力的過程,受到遺傳、環(huán)境等多種因素的影響。為了尋找與性發(fā)育啟動(dòng)相關(guān)的基因,本研究選擇性發(fā)育啟動(dòng)時(shí)間有明顯差異的近交品系小鼠C3H/HeJ(C3)和C57BL/6J(B6)進(jìn)行正交和反交,建立了兩個(gè)F2代家系。鑒定小鼠性發(fā)育啟動(dòng)的方法在雄鼠中采用觀察其陰莖-包皮分離,在雌鼠中采用觀察其陰門開啟。實(shí)驗(yàn)分析了親本、正反交子一代及其子二代的性發(fā)育啟動(dòng)天數(shù)的差異。結(jié)果顯示在親本中性發(fā)育啟動(dòng)差異極顯著(P=3.7×1

2、0-13),在子一代中正反交性發(fā)育啟動(dòng)差異顯著(P=5.4×10-3),子二代正反交沒有顯著差異(P=0.0941)。并計(jì)算出小鼠性發(fā)育啟動(dòng)的遺傳率在正反交家系中分別為63.97％和68.48%。說明本研究成功地建立了兩個(gè)家系。從534只F2代雌性小鼠中只挑選一窩同胞數(shù)在6~10只范圍內(nèi)的小鼠個(gè)體作為的實(shí)驗(yàn)樣本,并在其中挑選出具有極端陰門開啟年齡的雌鼠259只(其中C386F2小鼠161只、B6C3F2小鼠98只)進(jìn)行全基因組遺傳位標(biāo)掃

3、描。每條染色體上選取4~7個(gè)STR或SNP位標(biāo)作為遺傳標(biāo)記,平均間距15~20CM。本實(shí)驗(yàn)室以往的研究工作已對(duì)6號(hào),13號(hào),X染色體進(jìn)行了先期掃描。并在正交F2代小鼠中X染色體上發(fā)現(xiàn)DXMit166與性發(fā)育啟動(dòng)顯著相關(guān)(LOD=3.856,P＜0.05)。在反交F2代小鼠中沒有陽性結(jié)果。本研究在前期工作的基礎(chǔ)上對(duì)其余17條染色體進(jìn)行基因組掃描以研究在其他染色體上是否還存在與性發(fā)育相關(guān)的區(qū)段。實(shí)驗(yàn)中分別采用連鎖分析和連鎖不平衡分析的方法對(duì)

4、分型數(shù)據(jù)進(jìn)行了分析和驗(yàn)證。在連鎖分析中發(fā)現(xiàn):正交F2代小鼠中,5號(hào)和12號(hào)染色體上各有一個(gè)區(qū)段提示與性狀相關(guān)(D5Mit367,LOD=2.423;D12Mit144,LOD=2.196),反交F2代小鼠中沒有陽性結(jié)果。并應(yīng)用連鎖不平衡分析驗(yàn)證了這兩個(gè)位點(diǎn)與小鼠性發(fā)育啟動(dòng)天數(shù)顯著相關(guān)(P＜0.05)。通過本實(shí)驗(yàn),使我們對(duì)小鼠全基因組中與性發(fā)育相關(guān)的位點(diǎn)有了更全面的了解,同時(shí)為下一步縮小相關(guān)區(qū)段,進(jìn)行精細(xì)定位奠定了基礎(chǔ)。此項(xiàng)研究最終也將為