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文檔簡介
1、隨著水稻基因組測序的逐漸完成,基因庫的不斷完善,水稻也成為了研究單子葉植物和禾本科的模式生物。近年來,許多與抗旱性,花期,育性等農(nóng)藝性狀相關(guān)的重要基因被成功克隆。水稻的花期,也稱抽穗期,是營養(yǎng)生長向生殖生長過渡的重要階段。所以對調(diào)控水稻開花相關(guān)基因的克隆,對研究水稻花期有著深遠的意義,有助于完善整個調(diào)控開花基因的體系,同時,對育種工作也有著遺傳學的指導作用。
本文通過過量表達技術(shù)(OverExpression)和RNA干擾
2、技術(shù)(RNAi)對水稻開花相關(guān)基因CDK1,CDK2,CDK3,CDK4,CDK5進行克隆。首先,用RT-PCR技術(shù)擴增出cDNA基因序列,然后設計OE引物和RNAi引物以DNA為模板運用PCR技術(shù)分別將CDK1,CDK2,CDK3,CDK4,CDK5基因的全長片段和干擾片段擴增出來,通過亞克隆技術(shù)將OE片段連接到構(gòu)建好的pCAMBIA1300-NOS-35S表達載體中,將干擾片段連接到pCAMBIA1300中,最終得到了10個構(gòu)建完成
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