IGF-I對(duì)ERα陽(yáng)性及陰性乳腺癌細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)的影響.pdf

1、類胰島素生長(zhǎng)因子-I(IGF-I)是人體內(nèi)一種重要的生長(zhǎng)因子，它對(duì)組織細(xì)胞的增殖、分化、凋亡及整個(gè)機(jī)體的生長(zhǎng)發(fā)育及腫瘤的發(fā)生發(fā)展均起著重要的調(diào)節(jié)作用。有研究表明，血液中IGF-I的水平與乳腺癌發(fā)生的幾率呈高度正相關(guān)。
　　 雌激素受體α(ERα)是類固醇激素受體超家族的成員之一，是一種配體依賴性轉(zhuǎn)錄因子，它與雌激素特異性結(jié)合，通過(guò)雌激素應(yīng)答元件(EREs)來(lái)調(diào)節(jié)基因的轉(zhuǎn)錄。ERα在70％的原發(fā)浸潤(rùn)性乳腺癌病例中都有表達(dá)，是激素拮

2、抗治療的重要靶標(biāo)，目前有多種抗雌激素的藥物都是針對(duì)ERα設(shè)計(jì)的。
　　 在一些乳腺癌細(xì)胞中，IGF-IR和ER均存在表達(dá)，這二者的信號(hào)通路存在復(fù)雜的相互作用。由于ER是一個(gè)促乳腺癌基因，這種相互作用對(duì)于乳腺癌的發(fā)生發(fā)展來(lái)說(shuō)非常重要。在體外條件下，pmol或是nmol濃度的IGF-I和IGF-II就可以刺激ERα陽(yáng)性細(xì)胞的增殖，而ERα陰性的細(xì)胞只有微量的反應(yīng)或是完全沒(méi)有反應(yīng)，揭示出IGF的活性對(duì)ERα的依賴。
　　 基于

3、上述原因，通過(guò)研究加深對(duì)IGF與ERα之間相互作用的認(rèn)識(shí)，對(duì)于理解乳腺癌的發(fā)生及發(fā)展意義重大。
　　 本課題采用RNA干擾的方法，通過(guò)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染可以表達(dá)靶向ERα的shRNA的質(zhì)粒，由ERα陽(yáng)性的乳腺癌細(xì)胞系MCF-7，構(gòu)建出ERα敲減的細(xì)胞株，獲得ERα表達(dá)抑制在50％以上的穩(wěn)定細(xì)胞株。在此基礎(chǔ)上，用IGF-I處理所獲得的ERα穩(wěn)定抑制細(xì)胞株，同時(shí)以轉(zhuǎn)染了陰性對(duì)照載體的細(xì)胞作為對(duì)照，用雙向電泳技術(shù)分析兩種細(xì)胞蛋白質(zhì)組的差異。選擇