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文檔簡介
1、目的:通過不同濃度的鮭魚降鈣素(calcitonin,CT)對離體培養(yǎng)鼠成骨細(xì)胞作用的比較,初步探討鮭魚降鈣素對成骨細(xì)胞增殖以及胰島素樣生長因-I(Insulin-like GrowthFactor-I,IGF-I)表達(dá)的影響,為促進(jìn)骨折后的骨修復(fù)和再生的臨床治療提供一定的理論依據(jù)。方法:取新生24h SD 乳鼠顱蓋骨,采用酶消化法培養(yǎng)成骨細(xì)胞(osteoblast,OB),經(jīng)酶解消化后得到原代成骨細(xì)胞,進(jìn)行體外培養(yǎng)并經(jīng)堿性磷酸酶(AL
2、P)和礦化結(jié)節(jié)染色(茜素紅法)后鑒定。將體外培養(yǎng)的成骨細(xì)胞用不同濃度(1×10-12~1×10-8 mol/ L)的CT 干預(yù)后,采用MTT 法(噻唑藍(lán)染色法)觀察OB的增殖;Gomori 鈣-鉆法檢測堿性磷酸酶(ALP)的表達(dá);RT-PCR 方法觀察胰島素樣生長因子-I (IGF-I) mRNA的表達(dá)。結(jié)果:經(jīng)細(xì)胞鑒定后證實其系成骨細(xì)胞;MTT 法檢測表明,降鈣素濃度為1×10-12 mol/L時就可以刺激OB 增殖,且隨CT濃度升高
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