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文檔簡介
1、目的
探討肝素對脂多糖誘導的人臍靜脈內皮細胞凋亡的影響。
方法
購自中國科學院上海細胞庫人臍靜脈內皮細胞系進行體外培養(yǎng),培養(yǎng)代數控制在3-5代之間,于培養(yǎng)液中給予100ng/nlLPS(脂多糖)+10ug/mlCHX(放線菌酮)處理以建立細胞凋亡模型,肝素處理組于模型條件培養(yǎng)液作用半小時后分別加入不同濃度的肝素(0.01U/ml,0.1U/ml,1U/ml及10U/ml)干預,共同孵育24h。光
2、鏡下觀察細胞形態(tài),四甲基偶氮唑藍還原反應(MTT法)測定細胞存活率以觀察細胞增殖變化;免疫熒光法在熒光顯微鏡下觀察細胞凋亡形態(tài);Annexin V-FITC/PI雙染流式細胞儀檢測細胞凋亡。
結果
模型組內皮細胞凋亡率明顯高于陰性對照組,不同濃度肝素組細胞凋亡率均低于模型組,同時細胞存活率增高(P<0.01)。
結論
肝素可通過抑制脂多糖誘導的人臍靜脈內皮細胞凋亡而保護內皮細胞功能
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