吉非替尼通過(guò)EGFR-AKT-β-catenin途徑抑制鼻咽癌腫瘤干細(xì)胞.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2009級(jí)博士學(xué)位論文吉非替尼通過(guò)EGFR／AKT／pcatenin途徑抑制鼻咽癌腫瘤干細(xì)胞●●’1^●UCancerStemCellsareRegulatedbyEGFR／AKT／p—cateninSignalingandPreferentiallyInhibitedbyGefitinibinNasopharyngealCarcinoma課題來(lái)源：973項(xiàng)目(2010CB529400)專業(yè)名稱學(xué)位申請(qǐng)人指導(dǎo)教師答辯委員會(huì)主

2、席答辯委員會(huì)成員腫瘤學(xué)馬磊肖廣惠曾木圣教授教授陳系古教授鐘雪云教授趙彤教授姚開(kāi)泰教授湛鳳凰教授李欣教授論文評(píng)閱人謝丹教授賀志敏教授陳龍華教授2012年4月20日廣州摘要經(jīng)過(guò)多年的努力，聯(lián)合應(yīng)用包括放療，化療和靶向治療等多種治療手段，療效始終在低水平徘徊。腫瘤干細(xì)胞理論對(duì)這一問(wèn)題提出了新的理解和治療前景。即傳統(tǒng)的治療手段僅僅針對(duì)腫瘤細(xì)胞群體中的普通細(xì)胞，對(duì)腫瘤干細(xì)胞沒(méi)有作用。必須聯(lián)合應(yīng)用針對(duì)腫瘤干細(xì)胞的治療手段，才能夠最終達(dá)到治愈的水平。

3、已有研究對(duì)此進(jìn)行了一定的探討。通過(guò)側(cè)群細(xì)胞，CDl33和CD44[jH性細(xì)胞對(duì)鼻咽癌中的腫瘤干細(xì)胞進(jìn)行了分離與鑒別【1819]。而且證實(shí)放化療可以引起腫瘤細(xì)胞染色質(zhì)的混亂，從而富集腫瘤干細(xì)胞【20】。在這些研究基礎(chǔ)上對(duì)鼻咽癌腫瘤干細(xì)胞調(diào)節(jié)機(jī)理進(jìn)行進(jìn)一步研究，并發(fā)現(xiàn)具有抑制作用的手段具有重要的診療意義。通過(guò)本次研究我們?cè)噲D證明，EGFR／AKT／13catenin信號(hào)通路對(duì)鼻咽癌腫瘤于細(xì)胞具有重要的調(diào)節(jié)，EGFR受體酪氨酸激酶特異性抑制劑

4、吉非替尼對(duì)鼻咽癌腫瘤干細(xì)胞具有選擇性抑制作用。研究?jī)?nèi)容及方法：一EGFR／AKT／f)catenin信號(hào)通路對(duì)鼻咽癌腫瘤干細(xì)胞具有調(diào)節(jié)作用1采用免疫組化手段檢鋇tJEGFR受體在鼻咽癌組織中的表達(dá)，確實(shí)EGFR受體確實(shí)在鼻咽癌人體組織標(biāo)本中表達(dá)情況。采用WestenBlot方法檢灝]EGFR受體在鼻咽癌細(xì)胞株CNE1，CNE2，58F610B，HNE1，HONE1，C6661中的表達(dá)情況。2采用WestenBlot方法檢、狽OEGFR信

5、號(hào)通路分子在不同信號(hào)作用下在鼻咽癌細(xì)胞中的變化情況。選取CNE1，CNE2細(xì)胞株，分別用EGFR配體EGF，特異性抑制劑吉非替尼和PDl53035；AKT特異性抑制劑LY294002；ERK特異性抑制齊UPD032590等試劑進(jìn)行處理，檢測(cè)PEGFR，EGFR，PAKTAKTPERK，ERK等通路分子蛋白表達(dá)情況。3采用細(xì)胞免疫熒光技術(shù)檢測(cè)pcmemn在EGFR配體EGF，特異性抑制劑吉非替尼，AKT特異性抑制劑LY294002作用下1