乙烯和1-MCP處理對‘安哥諾’李冷藏期間果實紅化的苯丙烷代謝的影響.pdf

1、本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，不同成熟度的‘安哥諾’李冷藏期間果肉會出現(xiàn)不同程度的紅化現(xiàn)象，推測果肉紅化與低溫誘導(dǎo)李果實啟動苯丙烷代謝合成紅色花青素物質(zhì)密切相關(guān)。為探明‘安哥諾’李冷藏期間果肉紅化與苯丙烷代謝的關(guān)系及調(diào)控機理，本文以‘安哥諾’李為材料，在0℃±1℃下冷藏100d，利用色差計、高效液相色譜儀(HPLC)、分光光度計、基因克隆和RT-PCR技術(shù)，從果實色度、酶活性、基因表達、紅化相關(guān)物質(zhì)的含量等多層次進行系統(tǒng)研究，旨在明確紅色花青素

2、物質(zhì)并闡明不同處理對‘安哥諾’李果實冷藏期間果肉紅化相關(guān)的苯丙烷代謝的影響，從而為更好的調(diào)控‘安哥諾’李果實冷藏期間果肉紅化的現(xiàn)象提供理論依據(jù)。
　　本論文的主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:
　　(1)隨著冷藏時間的延長，‘安哥諾’李果肉由黃綠色逐漸呈現(xiàn)淡黃色、淡紅色、鮮紅色，紅化率和紅化指數(shù)均呈現(xiàn)上升趨勢;果皮著色面積由60％左右逐漸增加到100％，1-MCP處理延緩了果實的紅化進程，乙烯處理加速了果實的紅化進程。
　　(2

3、)不同處理隨冷藏時間的延長均有不同程度的紅化現(xiàn)象，對照‘安哥諾’李果實冷藏期間，a*值逐漸升高，L*值和H*值降低，乙烯處理加速了‘安哥諾’李果實L*值和H*值降低、a*值上升，1-MCP處理的作用相反。
　　(3)根據(jù)PAL、CHI、DFR、F3H、ANS、UFGT基因保守序列分別設(shè)計特異引物，以‘安哥諾’果肉cDNA為模板，分別擴增得到的816bp、452bp、550bp、688bp、714bp、938bp的‘安哥諾’李的基因

4、片段;同源性分析表明，這6個酶的基因序列與大多數(shù)已登錄的植物的基因序列同源性大于90％。
　　(4)運用熒光定量PCR技術(shù)，對不同處理的‘安哥諾’李的6個紅化相關(guān)基因的表達進行分析，結(jié)果表明:乙烯處理和1-MCP處理都抑制了冷藏果和后熟果的PAL基因表達。對冷藏果來說，乙烯處理明顯抑制了CHI基因的表達，使DFR、F3H、ANS、UFGT基因的表達上調(diào);1-MCP處理使DFR基因的表達延遲，CHI、DFR、F3H、ANS、UFGT

5、基因的表達下調(diào)。對后熟果來說，乙烯處理使PAL、CHI、UFGT基因的表達提前，DFR、F3H、ANS基因的表達上調(diào)，1-MCP處理的作用相反。
　　(5)利用分光光度計法，研究了不同處理對采后‘安哥諾’李冷藏期間果實紅化相關(guān)酶活性變化的影響，結(jié)果表明:對冷藏果來說，乙烯處理和1-MCP處理均提高了F3H的活性，同時降低了PAL的活性，乙烯處理使DFR、ANS、UFGT的活性處于較高水平，1-MCP處理降低了C4H、4CL、CHI

6、、DFR、ANS、UFGT的活性。對后熟果來說，乙烯處理抑制C4H的活性上升，使4CL、ANS、DFR的活性維持在較高水平，使CHI、UFGT的活性上升提前;1-MCP處理使C4H、CHI的活性上升，使4CL、DFR的活性降低，使ANS酶活性的峰值提前50d，使UFGT酶活性的峰值延遲25d且上升幅度變小。
　　(6)利用高效液相色譜和分光光度計分別研究了不同處理對‘安哥諾’李果實冷藏期間總花青素含量和矢車菊素含量的影響，結(jié)果表明