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文檔簡介
1、目的:探討CHIP(carboxy terminus of Hsc70 interacting protein,Hsc70羧基端相互作用蛋白)對腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87和U251生物學(xué)行為的影響。
方法: Western blot實驗觀察CHIP siRNA、CHIP過表達(dá)質(zhì)粒能否干涉腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞中CHIP蛋白的表達(dá);CCK-8細(xì)胞增殖實驗檢測CHIP基因干涉后對U87和U251兩種腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的影響;流式細(xì)胞儀檢測兩種腦膠質(zhì)瘤
2、細(xì)胞周期及凋亡的變化;Transwell細(xì)胞遷移實驗觀察CHIP基因干涉后對U87和U251兩種腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移能力的影響;Transwell細(xì)胞侵襲實驗觀察CHIP基因干涉后對兩種腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲能力的影響。
結(jié)果: CHIP siRNA、CHIP過表達(dá)質(zhì)粒能夠干涉U87和U251兩種腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞中CHIP蛋白的表達(dá)(P<0.001);CHIP siRNA干涉后兩種腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖速度明顯增快,而過表達(dá)CHIP后兩種腦膠質(zhì)
3、瘤細(xì)胞的增殖速度明顯減慢,72、96 h干涉最明顯(P<0.001);與對照組相比CHIP siRNA干涉后兩種腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞G0/G1期細(xì)胞所占比例減少,S期、G2/M期細(xì)胞所占比例增加;而過表達(dá)CHIP后兩種腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞G0/G1期細(xì)胞所占比例增加,S期、G2/M期細(xì)胞所占比例減少;CHIP siRNA干涉后與對照組相比腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251凋亡細(xì)胞數(shù)減少(P<0.001),對腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87凋亡的影響與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P
4、>0.05);而過表達(dá)CHIP后與對照組相比腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251凋亡細(xì)胞數(shù)增加(P<0.001),對腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87凋亡的影響與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);CHIP siRNA干涉后U87和U251兩種腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的遷移侵襲能力與對照組相比分別增加了9%(P<0.05)、27%(P<0.01)和18%、36%(P<0.01);過表達(dá)CHIP后U87和U251兩種腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的遷移侵襲能力與對照組相比分別降低了45%(P
5、<0.001)、37%(P<0.01)和27%、38%(P<0.01)。
結(jié)論:1.CHIP siRNA能夠促進(jìn)U87和U251兩種腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞G0/G1期進(jìn)展,從而促進(jìn)兩種腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖;CHIP siRNA能夠抑制腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251的凋亡;并且能夠促進(jìn)兩種腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的遷移、侵襲;2.過表達(dá)CHIP能夠阻礙U87和U251兩種腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞G0/G1期進(jìn)展,從而抑制兩種腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖;過表達(dá)CHIP能夠促進(jìn)腦膠質(zhì)瘤
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