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1、目的：以增強(qiáng)型綠色熒光蛋白(EGFP)作為陽性對(duì)照，使腫瘤壞死因子受體1的抗體融合蛋白(TNFR1-IgG4)在中華倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞中高效表達(dá)，為TNFRl-IgG4的功能研究和臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。 方法：分別以NheI和XbaI單酶切和NheI和XbaI雙酶切進(jìn)行pMM-TNFRl-IgG4/WG和pMM-EGFP-IgG4/WG鑒定。用Not I對(duì)質(zhì)粒pMM-TNFR1-IgG4/WG和pMM-EGFP-IgG4/WG線
2、性化，用Nde I對(duì)質(zhì)粒pMMGR線性化。用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法分別將以上質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO細(xì)胞中，經(jīng)G418、透析血清篩選后得到克隆，MTX加壓后進(jìn)行無血清培養(yǎng)，用熒光顯微鏡觀察，SDS-PACE 和WesternBlot檢測(cè)它們?cè)贑HO細(xì)胞中的表達(dá)情況。 結(jié)果：將真核表達(dá)載體pMM-TNFR1-IgG4/WG、pMM-EGFP-IgG4/WG和pMMGR順利轉(zhuǎn)染至CHO細(xì)胞中，EGFP陽性克隆在熒光顯微鏡下均呈綠色，用Protein-
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