2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、目的:以增強(qiáng)型綠色熒光蛋白(EGFP)作為陽性對(duì)照,使腫瘤壞死因子受體1的抗體融合蛋白(TNFR1-IgG4)在中華倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞中高效表達(dá),為TNFRl-IgG4的功能研究和臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。 方法:分別以NheI和XbaI單酶切和NheI和XbaI雙酶切進(jìn)行pMM-TNFRl-IgG4/WG和pMM-EGFP-IgG4/WG鑒定。用Not I對(duì)質(zhì)粒pMM-TNFR1-IgG4/WG和pMM-EGFP-IgG4/WG線

2、性化,用Nde I對(duì)質(zhì)粒pMMGR線性化。用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法分別將以上質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO細(xì)胞中,經(jīng)G418、透析血清篩選后得到克隆,MTX加壓后進(jìn)行無血清培養(yǎng),用熒光顯微鏡觀察,SDS-PACE 和WesternBlot檢測(cè)它們?cè)贑HO細(xì)胞中的表達(dá)情況。 結(jié)果:將真核表達(dá)載體pMM-TNFR1-IgG4/WG、pMM-EGFP-IgG4/WG和pMMGR順利轉(zhuǎn)染至CHO細(xì)胞中,EGFP陽性克隆在熒光顯微鏡下均呈綠色,用Protein-

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