版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、目的:探討B(tài)型鈉尿肽(Brain/B-type natriuretic peptide,BNP)抑制心臟成纖維細(xì)胞(Cardiac fibroblasts,CFs)增殖機(jī)制及其與TGF-β、鈉尿肽受體(natriureticpeptide receptors,NPRs)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的關(guān)系。 方法:采用胰酶消化法和差速貼壁法提取原代乳鼠心臟成纖維細(xì)胞并純化,以形態(tài)學(xué)及免疫組織化學(xué)進(jìn)行細(xì)胞鑒定:原代CFs經(jīng)無血清DMEM培養(yǎng)24h
2、同步化處理后,采用重組心肌營(yíng)養(yǎng)素(Cardiotrophin-1,CT-1)刺激細(xì)胞,加入不同濃度BNP(5×10-4mol/L、5×10-5mol/L、5×10-6mol/L、5×10-7mol/L、5×10-8mol/L、5×10-9mol/L)進(jìn)行Brdu增殖檢測(cè)實(shí)驗(yàn);以CFs為對(duì)象,同步化處理后,加入BNP、TGF-β1的I型受體特異性抑制劑SB-431542、鈉尿肽受體A(natriureticpeptide receptor
3、-A,NPR-A)抑制劑CANF4-23、BNP+SB-431542和BNP+CANF4-23干預(yù),放射免疫檢測(cè)cGMP;以CFs為對(duì)象,同步化處理后,用CT-1刺激增殖24h,分別加入BNP和SB-431542,分為BNP組、SB-431542組和BNP+SB-431542組,干預(yù)后收集培養(yǎng)液檢測(cè)細(xì)胞因子TGF-β1濃度。收集細(xì)胞提取總RNA,逆轉(zhuǎn)錄為cDNA后,行熒光實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)BNP組、SB-431542組和BNP+SB-4
4、31542組smad4 mRNA變化。 結(jié)果: 1.采用胰酶消化法和差速貼壁法原代提取純化的CFs存活率高,純度好。 2.不同濃度的BNP對(duì)CT-1刺激細(xì)胞增殖的抑制程度不同,隨著BNP濃度減小,抑制CT-1刺激心肌成纖維細(xì)胞的增殖作用減弱,存在明顯的劑量依賴效應(yīng),但兩者并非簡(jiǎn)單的反比關(guān)系,在5×10-6~5×10-7mol/L時(shí)變化最顯著。 3.各實(shí)驗(yàn)組在加藥后CFs胞內(nèi)cGMP水平變化不一,BNP組和
5、BNP+SB-431542組胞內(nèi)cGMP水平分別為6.16±1.30 pmol/ml和6.01±1.17pmol/ml,與對(duì)照組相4.57±1.25pmol/ml相比明顯升高(P<0.05,n=6),BNP組和BNP+SB-431542組之間沒有顯著區(qū)別。其他各藥物組與對(duì)照組相比沒有顯著差異(P>0.05,n=6)。 4.BNP組、SB-431542組、BNP+SB-431542組三組TGFβ1濃度與對(duì)照組相比明顯降低(P<0.
6、05),但不同藥物組之間沒有顯著差異(P>0.05)。BNP組、SB-431542組、BNP+SB-431542組三組較正常組smad4 mRNA水平明顯下降(P<0.05),并且BNP+SB-431542組smad4 mRNA表達(dá)水平顯著低于BNP組和SB-431542組(P<0.01),而后兩者smad4 mRNA表達(dá)無明顯差異(P>0.05)。 結(jié)論: 1.BNP抑制CT-1刺激增殖的CFs有劑量依賴性,但非普通的
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- TGF-β1在應(yīng)力介導(dǎo)的牙周膜成纖維細(xì)胞增殖中的作用及其機(jī)制.pdf
- TGF-β通路在成纖維細(xì)胞調(diào)控氣道上皮干細(xì)胞增殖中的作用機(jī)制.pdf
- SiRNA沉默TGF-βRⅡ及其對(duì)增生性瘢痕成纖維細(xì)胞增殖的影響.pdf
- 銀杏葉提取物對(duì)心肌成纖維細(xì)胞增殖、Ⅰ型膠原及TGF-β受體表達(dá)的影響.pdf
- SAHA對(duì)TGF-β誘導(dǎo)人胚肺成纖維細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化的影響.pdf
- TGF-β-,1-促進(jìn)體外培養(yǎng)的人成纖維細(xì)胞增殖與分化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 靶向TGF-βⅡ型受體的核酸適配子對(duì)Tenon囊成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的作用及機(jī)制研究.pdf
- 姜黃素抑制SSc成纖維細(xì)胞TGF-β信號(hào)系統(tǒng)作用機(jī)理研究.pdf
- B型鈉尿肽與血壓變異性的關(guān)系.pdf
- 培養(yǎng)胚胎、小兒皮膚成纖維細(xì)胞的比較及TGF-β1對(duì)小兒成纖維細(xì)胞的干預(yù)研究.pdf
- TGF-β1-mTOR信號(hào)通路在虎杖白藜蘆醇抑制瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞增殖中的作用及機(jī)制.pdf
- 黃芩素對(duì)TGF-β1體外誘導(dǎo)肺成纖維細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞分化的影響.pdf
- RNA干擾沉默STAT3基因?qū)GF-β1誘導(dǎo)的成纖維細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化的影響及其機(jī)制研究.pdf
- 強(qiáng)脈沖光對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)的成纖維細(xì)胞增殖的影響及ERK抑制劑的作用.pdf
- 溶血磷脂酸對(duì)大鼠心臟成纖維細(xì)胞增殖、凋亡及其受體表達(dá)的影響.pdf
- TGF-β1對(duì)體外血管外膜成纖維細(xì)胞的影響.pdf
- 壓力對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞合成TGF-β1的影響.pdf
- 串珠素對(duì)成纖維細(xì)胞增殖的影響及其與堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)的關(guān)系.pdf
- 當(dāng)歸補(bǔ)血總苷抑制TGF-β1刺激的人胚肺成纖維細(xì)胞膠原表達(dá)及作用機(jī)制.pdf
- 己酮可可堿對(duì)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞增殖、TGF-βI及Ⅰ、Ⅲ型前膠原mRNA表達(dá)的影響.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論