內(nèi)皮細(xì)胞a7受體與血管新生之間關(guān)系的研究.pdf

1、背景:血管新生在人類健康中具有重要的生理學(xué)及病理學(xué)意義。生理學(xué)血管新生不僅在機(jī)體胚胎發(fā)育中起重要作用，是機(jī)體各組織器官發(fā)育分化的前提，而且是成人創(chuàng)傷愈合和女性月經(jīng)周期正常維持的保障。而病理性血管生成則與人類多種疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。如惡性腫瘤、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。因此進(jìn)行血管新生內(nèi)皮靶標(biāo)的研究具有重要意義。α7受體屬于配體門控離子通道型受體，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周神經(jīng)系統(tǒng)具有十分重要作用，參與神經(jīng)通路形成、維持和多種生

2、理功能調(diào)節(jié)。而在非神經(jīng)細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞，α7受體參與內(nèi)皮細(xì)胞多種生物活性物質(zhì)的分泌和釋放，參與內(nèi)皮細(xì)胞與其他細(xì)胞間信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，參與內(nèi)皮細(xì)胞血管新生調(diào)節(jié)，從而提出了血管新生內(nèi)皮細(xì)胞乙酰膽堿新靶標(biāo)。本研究首先以內(nèi)皮細(xì)胞α7受體為靶標(biāo)，HUVECs、心梗大鼠和荷瘤小鼠體內(nèi)移植瘤為模型，了解α7受體在HUVECs、心梗大鼠內(nèi)皮細(xì)胞基因及蛋白水平的表達(dá)及其配體的調(diào)節(jié)作用，以及α7受體在細(xì)胞機(jī)制和體內(nèi)外血管新生中的調(diào)節(jié)作用。以探討α7受體作為一種局部“

3、荷爾蒙”受體，在內(nèi)皮細(xì)胞上的藥理學(xué)特征及其在血管新生中的調(diào)節(jié)作用。其次本研究對(duì)25種沙利度胺類新衍生物進(jìn)行篩選，旨在發(fā)現(xiàn)具有抑制血管新生作用的先導(dǎo)化合物。 方法:1、RT-PCR和免疫組化測(cè)HUVECsα7受體mRNA和蛋白表達(dá)，并探討煙堿、膽堿、美加明和α-BTX對(duì)α7受體表達(dá)的影響。共聚焦顯微鏡、MTT和體外血管索鑒定探討α7受體對(duì)HUVEC細(xì)胞機(jī)制的影響。大鼠心梗模型和荷瘤小鼠體內(nèi)移植瘤模型探討α7受體與血管新生之間的關(guān)系

4、。2、首先通過(guò)MTT法篩選25種沙利度胺類新衍生物中具有內(nèi)皮細(xì)胞特異性抑制作用的新衍生物，隨后通過(guò)荷瘤小鼠體內(nèi)移植瘤模型了解具有內(nèi)皮細(xì)胞特異性抑制作用的新衍生物對(duì)荷瘤小鼠體內(nèi)移植瘤生長(zhǎng)及移植瘤內(nèi)毛細(xì)血管密度的影響。 結(jié)果:1、內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)α7受體。2、在非興奮性細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞，激動(dòng)劑上調(diào)α7受體表達(dá)，并能夠促進(jìn)胞內(nèi)Ca2+釋放、內(nèi)皮細(xì)胞增殖及體外血管索形成，促進(jìn)血管新生而促進(jìn)側(cè)枝循環(huán)的建立和腫瘤生長(zhǎng)；拮抗劑作用反之。3、沙利度胺

5、類新衍生物中W-37和W-42衍生物通過(guò)抑制荷瘤小鼠體內(nèi)移植瘤血管新生而抑制移植瘤生長(zhǎng)。 結(jié)論:興奮性與非興奮性細(xì)胞α7受體mRNA表達(dá)機(jī)制不完全相同?？赡艽嬖讦?受體的多樣性：①、非興奮性細(xì)胞與興奮性細(xì)胞α7受體結(jié)構(gòu)不同，因而功能不同。②、同一組織α7受體存在著不同的結(jié)構(gòu)，不同結(jié)構(gòu)發(fā)揮著不同的功能。③、興奮性與非興奮性細(xì)胞α7受體結(jié)構(gòu)相同，但不同部位α7受體表達(dá)及功能不完全相同。內(nèi)皮細(xì)胞α7受體可作為血管新生靶標(biāo)而用于血管新生