Survivin、Smac和Ki-67在肝外膽管異型增生組織和癌組織中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：肝外膽管癌是一種相對(duì)少見的疾病，預(yù)后很差，其病因和發(fā)病機(jī)制不清，但它的發(fā)生也經(jīng)歷了正常膽管上皮到異型增生上皮到癌變的病理過程。在這個(gè)病理過程中，凋亡相關(guān)基因蛋白Survivin、Smac和核增殖抗原Ki-67的作用還未完全明確。本研究通過檢測(cè)Survivin、Smac和Ki-67在肝外膽管正常上皮組織、異型增生組織和癌組織中的表達(dá)，探討Survivin、Smac和Ki-67在肝外膽管癌發(fā)生發(fā)展中的作用，分析在肝外膽管癌發(fā)生發(fā)展中S

2、urvivin、Smac和Ki-67的相互作用，了解Survivin、Smac和Ki-67與肝外膽管癌組織病理學(xué)特征、臨床分期和預(yù)后的關(guān)系。 方法：標(biāo)本：27例肝外膽管癌手術(shù)切除標(biāo)本，包括24例高、中分化腺癌，3例低分化、未分化腺癌；10例肝外膽管異型增生組織； 5例正常膽管上皮組織。所有標(biāo)本經(jīng)10％甲醛固定，石蠟包埋，進(jìn)行4 μm連續(xù)切片10張。HE染色后，至少兩名病理醫(yī)師進(jìn)行組織學(xué)診斷。異型增生組織診斷標(biāo)準(zhǔn)如下：細(xì)胞排列紊亂

3、，層次增多，極性消失，大小形態(tài)不等，有輕中度的核異型，偶有分裂相。所有標(biāo)本采用免疫組化S-P法檢測(cè)Survivin、Smac和Ki-67的表達(dá)。免疫組化陽性染色標(biāo)準(zhǔn)評(píng)定采用半定量法。每張切片從陽性染色最強(qiáng)的部位開始，400倍光鏡下連續(xù)觀察5個(gè)視野，根據(jù)Survivin、Smac和Ki-67陽性細(xì)胞所占的百分比分為4個(gè)等級(jí)：陽性細(xì)胞所占百分比小于5％為陰性(-)；在6％-25％之間為弱陽性(+)；在26％-50％之間為中等陽性(++)；大

4、于50％為強(qiáng)陽性(+++)。統(tǒng)計(jì)方法：利用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。陽性率比較采用卡方檢驗(yàn)和確切概率法。相關(guān)性檢驗(yàn)采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析。p<0.05被認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： 1.Survivin、Smac和Ki-67表達(dá)特征：Survivin在肝外膽管異型增生組織和癌組織中表達(dá)，陽性表達(dá)主要表現(xiàn)為胞漿淺黃色或黃色片狀或細(xì)顆粒狀著色，另外有4例表現(xiàn)為棕黃色核著色。Survivin在異型增生組織中3

5、例弱陽性表達(dá)，1例中等陽性表達(dá)，1例強(qiáng)陽性表達(dá)。在癌組織中，8例弱陽性表達(dá)，5例中等陽性表達(dá)，7例強(qiáng)陽性表達(dá)。Smac在正常膽管上皮組織、異型增生組織和癌組織中均有陽性表達(dá)，為胞漿黃色或棕黃色片狀或顆粒狀著色，核染色被認(rèn)為是非特異性著色。Smac在正常上皮組織中1例中等陽性表達(dá)，1例強(qiáng)陽性表達(dá)。在異型增生組織中2例弱陽性表達(dá)，3例中等陽性表達(dá)。在癌組織中7例弱陽性表達(dá)，8例中等陽性表達(dá)，8例強(qiáng)陽性表達(dá)。Ki-67在異型增生組織和癌組織中

6、表達(dá)，陽性表達(dá)表現(xiàn)為胞核棕黃色或棕褐色著色。Ki-67在異型增生組織中1例弱陽性表達(dá)，1例中等陽性表達(dá)，2例強(qiáng)陽性表達(dá)。在癌組織中7例弱陽性表達(dá)，10例中等陽性表達(dá)，5例強(qiáng)陽性表達(dá)。 2.Survivin、Smac和Ki-67在肝外膽管正常上皮組織、異型增生組織和癌組織中表達(dá)的比較：Survivin正常上皮組織中陽性表達(dá)率為20％，異型增生組織中陽性表達(dá)率50％，癌組織中陽性表達(dá)率74.1％。正常上皮組織和癌組織中Survivi

7、n表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=O.037

8、-67表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.038<0.05)。 3.Survivin、Smac和Ki-67在肝外膽管異型增生組織及癌組織中表達(dá)的相關(guān)性分析：在10例異型增生組織中，1例Survivin、Smac和Ki-67同時(shí)陽性表達(dá)，陽性表達(dá)在幾乎相同的組織部位，1例同時(shí)陰性表達(dá)。在27例肝外膽管癌組織中15例Survivin、Smac和Ki-67同時(shí)陽性表達(dá)，4例陽性表達(dá)在幾乎相同的組織部位，2例同時(shí)陰性表達(dá)。SurViVin與S

9、mac，Survivin與Ki-67，在肝外膽管異型增生組織中和癌組織中的表達(dá)無相關(guān)性。Smac與Ki-67在肝外膽管異型增生組織中的表達(dá)有明顯的正相關(guān)(r=0.688，p=0.028<0.05)，Smac和Ki-67在癌組織中表達(dá)無相關(guān)性(r=0.371，p=0.057>0.05)。 4.Survivin、Smac和Ki-67的表達(dá)與肝外膽管癌組織病理學(xué)特征和臨床分期的比較：Survivin、Smac和Ki-67在肝外膽管高、

10、中分化癌中的表達(dá)與低分化、未分化癌中的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，在無血管神經(jīng)浸潤(rùn)無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肝外膽管癌組織中的表達(dá)與有血管神經(jīng)浸潤(rùn)有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，在Ⅰ期+Ⅱ期癌組織中的表達(dá)與Ⅲ期+Ⅳ期癌組織的表達(dá)差異亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論： 1．凋亡相關(guān)基因蛋白Survivin、Smac和核增殖抗原Ki-67在肝外膽管正常上皮組織、異型增生組織和癌組織中的表達(dá)呈逐漸升高的趨勢(shì)，說明Survivin、Smac和K

11、i-67參與了肝外膽管癌的形成過程，凋亡和增殖失衡可能在肝外膽管癌發(fā)生發(fā)展中起重要作用。 2．在肝外膽管正常上皮組織到異型增生組織到癌的序列過程中Survivin、Smac和Ki-67表達(dá)的逐漸升高，代表著正常細(xì)胞經(jīng)過異型增生向惡性轉(zhuǎn)化的細(xì)胞生物學(xué)行為特征，提示組織學(xué)尚正常的組織存在著異型增生的可能，其過高表達(dá)代表細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)變的可能。 3．在肝外膽管癌發(fā)生發(fā)展中存在多個(gè)基因的精密調(diào)控，單一的基因可能不能解釋腫瘤的生物