CD133+C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞體外侵襲能力及在大鼠C6膠質(zhì)瘤模型體內(nèi)分布侵襲模式研究.pdf

1、天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文CD133C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞體外侵襲能力及在大鼠C6膠質(zhì)瘤模型體內(nèi)分布侵襲模式研究姓名：于圣平申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：臨床醫(yī)學(xué)；外科學(xué)（神經(jīng)外科）指導(dǎo)教師：楊學(xué)軍201205天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的成瘤能力。結(jié)果是：成功分離和鑒定了C6細(xì)胞中的CDl33細(xì)胞；干細(xì)胞培養(yǎng)基中懸浮的干細(xì)胞第一天分裂成2到3個(gè)的細(xì)胞團(tuán)，第二天可見(jiàn)數(shù)個(gè)的細(xì)胞團(tuán)，4到5天后形成典型的細(xì)胞球；Transwell檢測(cè)膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的侵

2、襲能力，顯示CDl33細(xì)胞比CDl33的侵襲能力強(qiáng)；從C6中分離的CDl33細(xì)胞能在大鼠體內(nèi)形成腫瘤。第二部分建立SD大鼠C6細(xì)胞的耳朵、皮下、顱內(nèi)模型。10只SD大鼠，在大鼠的一只耳朵注射CDl33C6細(xì)胞，另一只注射CDl33一C6細(xì)胞，實(shí)時(shí)觀察腫瘤的形成和血管生成情況，結(jié)果顯示CDl33C6細(xì)胞形成的腫瘤更大，更易形成異常密集的腫瘤血管，腫瘤血管呈煙霧狀分布于腫瘤周。40只SD大鼠制作肋下皮下腫瘤模型，取不同生長(zhǎng)階段的皮下腫瘤，石

3、蠟切片，免疫組織化學(xué)法染色CDl33和HIFlQ，觀察同一時(shí)期CDl33和HIFlQ的表達(dá)是否有相關(guān)性，CDl33陽(yáng)性細(xì)胞分布與血管的關(guān)系。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著皮下腫瘤的生長(zhǎng)，出現(xiàn)缺血和壞死，CDl33陽(yáng)性的細(xì)胞逐漸趨向血管周聚集，而且CDl33和HIFlQ的組化染色半定量分析呈現(xiàn)出正相關(guān)。20只SD大鼠制作顱內(nèi)原位膠質(zhì)瘤模型，取顱內(nèi)腫瘤制作石蠟切片和鏡像切片，使用CDl33，Nestin標(biāo)記膠質(zhì)瘤干細(xì)胞，LuxolFastBlue標(biāo)記白質(zhì)纖

4、維束，Westernblot檢測(cè)顱內(nèi)腫瘤不同部位CDl33蛋白的表達(dá)情況。研究顯示，CDl33C6細(xì)胞在腫瘤內(nèi)分布于壞死區(qū)周，血管周；在腫瘤邊界侵襲的前緣也有CDl33C6細(xì)胞分布，皇簇圍繞于血管長(zhǎng)軸，并分布于白質(zhì)纖維束周及纖維束間，其細(xì)胞長(zhǎng)軸與纖維束走行相一致。CDl33蛋白在腫瘤的邊緣和腫瘤與周圍腦組織的交界區(qū)表達(dá)較強(qiáng)，在腫瘤所在的對(duì)側(cè)大腦的胼胝體區(qū)也有很弱的表達(dá)。結(jié)論：在體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)均證實(shí)CDl33C6細(xì)胞的侵襲能力強(qiáng)于CDl3