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1、[目的]研究?jī)?nèi)毒素刺激大鼠原代肝星狀細(xì)胞增殖活化過(guò)程中ERK1/2信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響及機(jī)制，為肝臟纖維化的預(yù)防和治療，提供了一定的理論實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
[方法]采用鏈霉蛋白酶、Ⅳ型膠原酶循環(huán)灌注消化大鼠肝臟，經(jīng)密度梯度高速離心，分離培養(yǎng)大鼠原代肝星狀細(xì)胞，細(xì)胞活率采用臺(tái)盼蘭拒染實(shí)驗(yàn)鑒定，HSCs鑒定通過(guò)結(jié)蛋白(desmin)免疫細(xì)胞化學(xué)法。將培養(yǎng)至第3天的HSCs隨機(jī)分為正常對(duì)照組、內(nèi)毒素組以及PDTC組，后兩組加入終濃度為1μ
2、g/ml的內(nèi)毒素刺激細(xì)胞，PDTC組同時(shí)加入終濃度為15μmol/L的PDTC,30min后收集各孔HSCs，采用BCA法提取細(xì)胞總蛋白，通過(guò)WesternBlot檢測(cè)HSCs內(nèi)P-ERK1/2水平。
[結(jié)果]內(nèi)毒素刺激原代培養(yǎng)的HSCs后，與正常對(duì)照組相比，ERK1/2磷酸化水平明顯上升(P＜0.01)，而PDTC能顯著降低該變化。
[結(jié)論]內(nèi)毒素可直接刺激大鼠原代HSCs引起細(xì)胞內(nèi)ERK1/2信號(hào)傳導(dǎo)通路
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