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1、目的對(duì)糖尿病合并真菌性角膜炎患者進(jìn)行回顧性研究總結(jié)該病特有的臨床特征,檢測(cè)MMP-9在糖尿病合并真菌性角膜潰瘍大鼠角膜上皮中的表達(dá)及與真菌性角膜潰瘍大鼠的差異,分子水平探討糖尿病合并真菌性角膜炎的致病機(jī)制。
方法87例糖尿病合并真菌性角膜炎患者和40例正常人真菌性角膜炎患者的人口學(xué)特征、臨床癥狀、病原學(xué)檢查、預(yù)后情況進(jìn)行回顧性研究。60只實(shí)驗(yàn)SD大鼠隨機(jī)分為3組,A組為空白對(duì)照組;B組為真菌性角膜潰瘍組;C組為糖尿病合并真菌性
2、角膜潰瘍組。造模后不同時(shí)間隨機(jī)抽取各組大鼠,裂隙顯微鏡下觀察角膜的形態(tài),HE染色觀察角膜組織學(xué)變化,免疫組織化學(xué)方法和蛋白免疫印跡檢測(cè)MMP-9的表達(dá)。
結(jié)果1、糖尿病合并真菌性角膜炎患者的人口學(xué)特征、臨床癥狀、病原菌類型及預(yù)后均和正常人真菌性角膜炎具有顯著差異(P<0.05)。
2、裂隙顯微鏡下拍照示C組造模后1d潰瘍形成,潰瘍較B組明顯;8d可見潰瘍面積縮小;12d可見角膜輕度水腫,潰瘍基本愈合,部分大鼠形成角膜
3、白斑。
3、HE染色示造模后1d,C組可見角膜水腫,基質(zhì)層大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),膠原纖維排列較B組更加紊亂。造模后6d,C組角膜水腫減輕,可見新生血管腔樣結(jié)構(gòu),B組新生血管成熟。造模后12d,B組與C組表現(xiàn)類似,基質(zhì)層纖維呈瘢痕樣重構(gòu),新生血管數(shù)量減少。
4.免疫組織化學(xué)示造模后1d,C組角膜潰瘍處上皮組織MMP-9表達(dá)明顯高于B組(P<0.05)。造模后2d,B組仍少于C組(P<0.05)。造模后3d,B組與C組無明顯
4、差異。造模后6d,B組表達(dá)明顯下降,C組較前無明顯降低。造模后12d,B組、C組MMP-9表達(dá)均下降。
5、蛋白免疫印跡示造模后2d,B組、C組較空白對(duì)照組明顯升高(P<0.05);造模后1d、2d、3d、6d,C組表達(dá)量明顯高于B組(P<0.05)。
結(jié)論1、糖尿病合并真菌性角膜炎有其自身的特點(diǎn),機(jī)體的高血糖狀態(tài)可能是真菌性角膜炎發(fā)病的一個(gè)重要危險(xiǎn)因素。
2、真菌性角膜炎中MMP-9的表達(dá)與角膜潰瘍的發(fā)展
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