褪黑素保護對乙酰氨基酚引起的肝細胞死亡.pdf

1、目的：過量使用對乙酰氨基酚(APAP)是造成急性肝損傷最常見的原因之一,其主要是由于APAP經(jīng)肝細胞色素氧化酶P450(CYP)2E1代謝為具有肝毒性的物質(zhì)而引起的。已有文獻證實,褪黑素(MT)對APAP誘導的急性肝損傷具有保護作用,然而具體分子機制仍不清楚。本研究探討了MT減輕凋亡誘導因子(AIF)介導的肝細胞死亡在APAP引起急性肝損傷中的作用。
　　方法：APAP組小鼠經(jīng)腹腔注射APAP(300mg/kg),MT+APAP組

2、小鼠注射APAP(300mg/kg)前30min經(jīng)腹腔注射不同劑量的MT(1.25,5,20mg/kg),對照組給予等容量的生理鹽水或MT。APAP處理后1h或4h剖殺小鼠,取肝臟和血清,采用蛋白免疫印跡、免疫組化、實時定量RT-PCR以及生物化學等方法檢測相應的分子和細胞指標。
　　結(jié)果：TUNEL實驗發(fā)現(xiàn),MT預處理顯著減輕APAP誘導的肝細胞死亡。進一步研究發(fā)現(xiàn),MT明顯抑制APAP激活絲氨酸/蘇氨酸激酶受體相互作用蛋白1(

3、RIP1)的活性;MT預處理抑制APAP引起肝臟c-Jun氨基端激酶(JNK)的磷酸化和Bax的線粒體轉(zhuǎn)位。此外,MT預處理顯著抑制APAP激活AIF由線粒體向核內(nèi)的轉(zhuǎn)移。然而,MT預處理對APAP上調(diào)肝臟CYP2E1蛋白水平無明顯影響,對APAP引起肝臟谷胱甘肽(GSH)耗竭也未發(fā)現(xiàn)明顯影響。
　　結(jié)論：MT預處理通過對抗APAP激活肝臟RIP1活性、JNK磷酸化和Bax的線粒體轉(zhuǎn)位,繼而抑制AIF入核介導肝細胞死亡,最終預防A