白藜蘆醇聯(lián)合阿糖胞苷對K562細(xì)胞的影響.pdf

1、目的：白藜蘆醇是一種天然植物提取物，具有多種生物學(xué)功能，并對多種腫瘤有顯著的抑制作用，本身無毒性作用，因此有望成為治療和預(yù)防腫瘤的新藥。本實驗通過觀察白藜蘆醇、阿糖胞苷單獨及聯(lián)合對體外培養(yǎng)的人白血病K562細(xì)胞株的生長抑制效應(yīng)、細(xì)胞周期影響及Fas／FasL、Survivin表達(dá)變化，探討白藜蘆醇與阿糖胞苷是否有聯(lián)合增效作用，并對其作用機(jī)制進(jìn)行初步探討。 方法：以人白血病K562細(xì)胞株為研究對象，不同濃度白藜蘆醇、阿糖胞苷單獨及

2、聯(lián)合處理K562細(xì)胞24、48、72h后，MTT法檢測細(xì)胞增殖抑制率，利用中效原理計算出各時間段內(nèi)白藜蘆醇、阿糖胞苷對K562細(xì)胞增殖抑制的中效濃度，以檢測二者有無聯(lián)合增效作用；白藜蘆醇、阿糖胞苷單獨及聯(lián)合處理K562細(xì)胞48h后，F(xiàn)CM檢測細(xì)胞周期分布變化；透射電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化和凋亡小體形成；免疫組織化學(xué)法檢測Fas、FasL蛋白表達(dá)；RT-PCR法檢測SurvivinmRNA的表達(dá)變化。 結(jié)果：不同劑量白藜蘆醇、阿糖

3、胞苷單獨作用24h、48h、72h和聯(lián)合作用24h、48h對K562細(xì)胞均有生長抑制作用，在一定范圍內(nèi)呈劑量、時間依賴性，兩種藥物聯(lián)合有協(xié)同增效作用。白藜蘆醇作用于K562細(xì)胞48h后，S期細(xì)胞比例增加，細(xì)胞發(fā)生S期阻滯；與阿糖胞苷聯(lián)合作用48h后使S期細(xì)胞比例下降，G2／M期細(xì)胞比例減少，細(xì)胞出現(xiàn)凋亡。白藜蘆醇、阿糖胞苷單獨及聯(lián)合作用可使K562細(xì)胞核漿比例下降，染色質(zhì)邊集，凋亡小體出現(xiàn)。白藜蘆醇處理K562細(xì)胞48h后，F(xiàn)as、Fa

4、sL蛋白表達(dá)增強(qiáng)；阿糖胞苷組Fas蛋白表達(dá)無顯著性變化，F(xiàn)asL表達(dá)升高；白藜蘆醇與阿糖胞苷聯(lián)合作用后Fas蛋白表達(dá)較單用白藜蘆醇無明顯變化，F(xiàn)asL表達(dá)陽性增高。白藜蘆醇、阿糖胞苷單獨或聯(lián)合作用可下調(diào)人白血病K562細(xì)胞survivn的表達(dá)。 結(jié)論：白藜蘆醇、阿糖胞苷單獨和聯(lián)合作用對K562細(xì)胞均有抑制作用，在一定劑量范圍內(nèi)兩種藥物具有協(xié)同作用；白藜蘆醇能影響K562細(xì)胞的細(xì)胞周期分布，與阿糖胞苷的作用周期相符，二者有協(xié)同作用