人參總皂苷對造血細胞和K562細胞EpoR表達的影響.pdf

1、人參是中醫(yī)學的“補氣生血”要藥，人參總皂苷(TSPG)是其主要藥物成分之一。我室既往的研究已表明：TSPG能夠促進紅系祖細胞的增殖與分化，促K562等白血病細胞凋亡，抑制其增殖，但其分子機制仍然不清楚。紅細胞生成素受體(EpoR)在造血細胞的增殖分化和K562細胞抗凋亡和向紅系細胞分化過程中起著關(guān)鍵的作用，受體與紅細胞生成素結(jié)合后產(chǎn)生信號轉(zhuǎn)導(STAT5)，最終啟動相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄。本研究以臍血造血細胞和K562細胞為實驗對象，在培養(yǎng)體系中

2、加入不同濃度TSPG與之共同培養(yǎng)24h，檢測兩者EpoR的變化，探討TSPG對兩者的EpoR表達的影響?，F(xiàn)將各部分簡介如下： 1.人參總皂苷對臍血造血細胞EpoR表達的影響：分離臍血單個核細胞，分組后用不同濃度TSPG(0，25，50，75，100mg/l)誘導24h，用流式細胞術(shù)，細胞ELISA測定細胞膜表面EpoR數(shù)量；細胞漿ELISA測定細胞漿內(nèi)EpoR數(shù)量；用免疫細胞化學染色觀察TSPG誘導前和誘導后細胞涂片中表達Epo

3、R的陽性率。結(jié)果顯示：50mg/l組的細胞膜表面的EpoR較0mg/l對照組顯著增多，細胞漿內(nèi)EpoR數(shù)量無變化，TSPG誘導后細胞涂片中表達EpoR的細胞陽性率較誘導前減少。結(jié)論：TSPG體外誘導臍血造血細胞能使其細胞膜表面的EpoR數(shù)量增加；細胞漿內(nèi)的EpoR數(shù)量未見增多，這可能是人參能促進造血細胞增殖與誘導其向紅系細胞分化的機理之一。 2.人參總皂苷對K562細胞EpoR表達的影響：體外培養(yǎng)K562細胞，用不同濃度TSPG

4、(0，50，100，200，300，500mg/l)誘導24h，用流式細胞術(shù)，細胞ELISA，測定細胞膜表面EpoR數(shù)量；細胞漿ELISA測定細胞漿內(nèi)EpoR數(shù)量；用激光共聚焦顯微鏡觀察對照組和TSPG誘導組K562細胞免疫熒光圖象。結(jié)果顯示：200mg/l以上組的細胞膜表面的EpoR較0mg/l對照組顯著減少，細胞漿內(nèi)EpoR數(shù)量隨TSPG濃度增大而增多，TSPG誘導后細胞膜熒光強度較誘導前減弱。研究表明：TSPG可誘導K562細胞膜