傷害性信息傳入誘導(dǎo)海馬神經(jīng)元血紅素氧化酶-1表達(dá)增加.pdf

1、目的：疼痛是臨床上常見(jiàn)的癥狀，在神經(jīng)系統(tǒng)中不僅存在痛覺(jué)信息的傳遞系統(tǒng)，而且還有復(fù)雜的痛調(diào)制網(wǎng)絡(luò)。海馬是邊緣系統(tǒng)的重要組成部分，除與學(xué)習(xí)、記憶、情緒有關(guān)外，還與痛感知及痛調(diào)制有關(guān)。有文獻(xiàn)報(bào)道，大鼠足底皮下注射甲醛溶液可引起海馬痛興奮神經(jīng)元和痛抑制神經(jīng)元放電頻率改變，提示海馬神經(jīng)元參與了傷害性信息的感知過(guò)程。此外，外周皮下注射甲醛溶液可引起大鼠海馬內(nèi)5-HT、FOS表達(dá)增加以及IL-2 mRNA表達(dá)上調(diào)，表明外周傷害性信息可傳入海馬，并可引

2、起海馬神經(jīng)元功能和代謝發(fā)生改變。 近些年發(fā)現(xiàn)，一些非經(jīng)典遞質(zhì)在痛覺(jué)信息傳遞和痛調(diào)制中發(fā)揮重要作用。一氧化碳(CO)作為新型遞質(zhì)，參與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的多種生理功能和病理過(guò)程。血紅素氧化酶(HO)是體內(nèi)產(chǎn)生CO的限速酶。HO-1是HO的誘導(dǎo)型同工酶，在氧化應(yīng)激、炎癥、缺氧等多種病理?xiàng)l件誘導(dǎo)下可過(guò)量表達(dá)。 我室以往的研究證實(shí)，外周傷害性信息傳入可引起海馬各區(qū)NOS表達(dá)增加，NO生成增多。已有研究證實(shí)，NOS/NO和HO/CO兩個(gè)

3、系統(tǒng)之間存在密切聯(lián)系，甲醛炎性痛是否能引起海馬血紅素氧化酶活性以及一氧化碳產(chǎn)生發(fā)生改變尚未見(jiàn)報(bào)道。 因此，本實(shí)驗(yàn)旨在觀察甲醛炎性痛過(guò)程中海馬各亞區(qū)神經(jīng)元HO-1表達(dá)改變及其變化的時(shí)程特征。 方法：健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠36只，體重260～280g，將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為6組，分別為對(duì)照組(Control組)、甲醛6h組、甲醛12h組、甲醛24 h組、甲醛48h組和甲醛72 h組，每組6只動(dòng)物.Con

4、trol組不予任何處理，直接斷頭取材。其余動(dòng)物均于足底注射甲醛后行痛反應(yīng)評(píng)分，分別于注射甲醛后不同時(shí)點(diǎn)首先測(cè)定大鼠機(jī)械刺激縮足反應(yīng)閾值和熱輻射縮足潛伏期，而后處死取海馬組織，用免疫組化染色觀察海馬各亞區(qū)HO-1表達(dá)改變。 結(jié)果：大鼠右后足底注射甲醛后，即刻出現(xiàn)舔、咬患足等自發(fā)痛行為，注射足出現(xiàn)典型的雙向性自發(fā)縮足反應(yīng)，持續(xù)1h以上。注射部位出現(xiàn)紅、腫等明顯的炎癥反應(yīng)，于足底注射甲醛后12h-24h最為明顯，隨后逐漸消退。

5、 與Control組比較，注射甲醛后各時(shí)間點(diǎn)大鼠注射足底損傷部位熱輻射縮足潛伏期和機(jī)械刺激縮足反射閾值均明顯升高(P＜0.01)。而非注射足熱輻射縮足潛伏期和機(jī)械刺激縮足反射閾值均明顯降低(P＜0.01)，其中以注射甲醛后24h最為明顯。 與Control組比較，甲醛6h組海馬CA1區(qū)、CA3區(qū)及DG區(qū)HO-1陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目明顯增加，陽(yáng)性細(xì)胞灰度值明顯降低，表明染色深度增加；與甲醛6h組比較，甲醛12h組海馬各區(qū)HO-1陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)

6、目進(jìn)一步增加，陽(yáng)性細(xì)胞染色深度也進(jìn)一步增加；注射甲醛24h時(shí)，海馬各區(qū)H0-1陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目和陽(yáng)性細(xì)胞染色深度增加最為顯著(P＜0.01)；注射甲醛48h時(shí)，海馬各區(qū)HO-1陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目較甲醛24h組有所減少，陽(yáng)性細(xì)胞灰度值增加，表明陽(yáng)性細(xì)胞染色深度降低，注射甲醛72h時(shí)，海馬CA1區(qū)、CA3區(qū)及DG區(qū)HO-1陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目和陽(yáng)性細(xì)胞染色深度均恢復(fù)至對(duì)照組水平。各時(shí)間點(diǎn)左右兩側(cè)海馬之間比較，無(wú)論是HO-1陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目還是陽(yáng)性細(xì)胞染色深度均無(wú)