氧化應(yīng)激對(duì)慢性靜脈性潰瘍形成的影響.pdf

1、目的：關(guān)于靜脈性潰瘍形成的確切機(jī)制尚存在爭議,國內(nèi)外學(xué)者提出了很多假說。其中氧化應(yīng)激反應(yīng)導(dǎo)致局部組織細(xì)胞損傷的機(jī)制研究已經(jīng)受到廣泛重視。慢性靜脈性潰瘍患者伴隨存在的氧化應(yīng)激狀態(tài)，促使細(xì)胞產(chǎn)生過量的ROS進(jìn)而通過激活白細(xì)胞，產(chǎn)生大量的炎癥介質(zhì)，影響組織細(xì)胞的正常生理代謝，通過激活凋亡受體等途徑，顯著增加細(xì)胞的凋亡，影響血管新生，最終導(dǎo)致皮膚潰瘍的形成。內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)以表達(dá)CD34、CD133和VEGFR2這三種表面標(biāo)志為特征，VE

2、GF受體(VEGFR)只存在于血管內(nèi)皮細(xì)胞表面，其中VEGFR2是一種具有強(qiáng)烈的酪氨酸激酶活性的蛋白，活化后可促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的分裂、遷移和增殖,對(duì)血管形成的信號(hào)傳遞起著重要作用。腫瘤壞死因子(TNF-α)主要作用是參與炎癥反應(yīng)和細(xì)胞凋亡過程的調(diào)控，其受體(TNFR1)在細(xì)胞凋亡途徑中發(fā)揮重要作用。在氧化應(yīng)激條件下, ROS通過激活TNFR1進(jìn)而損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，血管內(nèi)膜損傷是血栓形成的條件之一，導(dǎo)致血管功能紊亂，從而阻斷局部組織的血供

3、而發(fā)生缺氧壞死。這可能是慢性靜脈性潰瘍形成的重要因素之一。因此本實(shí)驗(yàn)的研究目的在于：明確靜脈性潰瘍氧化應(yīng)激反應(yīng)是否對(duì)EPCs的凋亡有影響，以及TNFR1在疾病發(fā)生演變過程中所起的作用。探討靜脈性潰瘍組織細(xì)胞及血管新生受損的機(jī)制。方法：1.測定氧化應(yīng)激產(chǎn)物MDA、GSH、抗超氧陰離子的含量。2.測定活性氧消除系統(tǒng)酶和抗氧化物質(zhì)GSH、SOD的含量。3.HE染色觀察潰瘍創(chuàng)面細(xì)胞形態(tài)學(xué)的改變；用免疫組織化學(xué)作CD34、TNFR1、CD133、

4、VEGFR2檢測。4.PCR檢測VEGFR2的表達(dá)情況。結(jié)果：1.HE染色見靜脈性潰瘍創(chuàng)面鱗狀上皮細(xì)胞排列紊亂，潰瘍基底部大量炎性滲出物，由壞死細(xì)胞、分解的組織組成，皮下組織見大量中性粒細(xì)胞浸潤，伴有肉芽組織增生，其中可見少量且分散的毛細(xì)血管、炎癥細(xì)胞和結(jié)締組織的各種成分。免疫組化顯示靜脈性潰瘍VEGFR-2、TNFR1、CD34、CD133的表達(dá)明顯低于對(duì)照組。2.與對(duì)照組比較,潰瘍病程<2周組MDA濃度均無明顯差異；在病程>2周和>

5、1月組,靜脈性潰瘍 MDA,GSH濃度顯著增加(P<0.05)，且高于對(duì)照組;病程>2周和>1月組中，靜脈性潰瘍組SOD，GSH，抗O2-濃度明顯減少(P<0.05)。3.PCR檢測VEGFR2 mRNA含量顯示病程>2周和>1月組靜脈性潰瘍低于燒傷潰瘍(0.413±0.105,0.268±0.096 vs0.872±0.126,0.905±0.112,P<0.05)。HE染色見靜脈性潰瘍創(chuàng)面鱗狀上皮細(xì)胞排列紊亂,潰瘍基底部大量炎性滲出

6、物,由壞死細(xì)胞、分解的組織組成,皮下組織見大量中性粒細(xì)胞浸潤,伴有肉芽組織增生,其中可見少量且分散的毛細(xì)血管、炎癥細(xì)胞和結(jié)締組織的各種成分。結(jié)論：1.靜脈性潰瘍創(chuàng)面氧化應(yīng)激反應(yīng)增強(qiáng),抗氧化能力減弱,并產(chǎn)生大量的氧化應(yīng)激產(chǎn)物。2.靜脈性潰瘍CD34、CD133、VEGFR2表達(dá)減少,TNFR1表達(dá)增加,血管新生受到明顯抑制。3.氧化應(yīng)激能夠抑制VEGFR2 mRNA表達(dá)。說明氧化應(yīng)激是導(dǎo)致內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量改變及功能受損的影響因素之一;TNF