柴苓湯對慢性環(huán)孢素A腎病大鼠腎臟氧化應(yīng)激的影響.pdf

1、目的：通過觀察中藥復(fù)方柴苓湯對慢性環(huán)孢素A腎?。?chronic cyclosporine A nephropathy，CCN）大鼠腎臟氧化損傷相關(guān)指標(biāo)的影響，探討柴苓湯對CCN大鼠腎臟的保護(hù)作用及機(jī)制，為該方的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：選取健康雌性清潔級SD大鼠40只，體重200±20g，實(shí)驗(yàn)動物自由進(jìn)食和飲水，動物實(shí)驗(yàn)室溫度控制在（22±2）℃。適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，隨機(jī)分為對照組（Control group）、模型組（C

2、sA group）、纈沙坦組（Valsartan group）、柴苓湯組（TCM group），每組10只。模型組、纈沙坦組及柴苓湯組給予CsA30mg·kg-1·d-1灌胃，連續(xù)28天，制備CCN大鼠模型，對照組每日灌服等容量橄欖油；造模的同時，纈沙坦組予纈沙坦10mg·kg-1·d-1、柴苓湯組予柴苓湯3g·kg-1·d-1，均灌胃給藥治療，其余兩組給予同劑量生理鹽水灌胃。每周末將所有大鼠分別放入代謝籠中，收集24小時尿液，采用酶聯(lián)

3、免疫吸附法（ELISA）測定尿液中8-羥基脫氧鳥苷（8-hydroxy-2'-deoxyguanosine，8-OhdG）、8-異構(gòu)前列腺素 F2α（8-Iso-Prostaglandin F2α，8-iso-PGF2α）的含量。第29天，全部大鼠逐一稱重，10％水合氯醛麻醉，游離股動脈取血，離心，留取上層血清，-4℃保存，生化檢測血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN），并計算肌酐清除率（Ccr）；采用比色法檢測血清中谷胱甘肽（GSH）、過

4、氧化氫酶（CAT）含量；切取小塊腎臟組織，4%多聚甲醛固定，行 HE、Masson染色，觀察各組大鼠腎臟組織病理改變。
　　結(jié)果：⑴所有大鼠均存活并納入最后統(tǒng)計。對照組大鼠精神狀態(tài)、活動情況、毛發(fā)、飲食量、飲水量、尿量等均無明顯改變。模型組大鼠精神萎靡、活動減少、對外界反應(yīng)遲鈍、飲食減少、飲水量下降、毛發(fā)變得黃而松亂、部分甚至脫落。纈沙坦組和柴苓湯組一般狀況較模型組有所改善。⑵HE染色顯示：對照組腎臟結(jié)構(gòu)基本正常，腎小管上皮細(xì)胞排

5、列整齊，無濁腫，腎間質(zhì)無水腫，偶可見炎性細(xì)胞浸潤；模型組腎間質(zhì)水腫，可見大量炎性細(xì)胞浸潤，腎小管上皮細(xì)胞變性、濁腫，甚則壞死、脫落；纈沙坦組及柴苓湯組腎間質(zhì)亦可見炎性細(xì)胞浸潤，腎小管上皮細(xì)胞濁腫，但均較模型組明顯減輕。Masson染色顯示：對照組腎組織結(jié)構(gòu)清晰，腎小管基底膜完整，腎間質(zhì)區(qū)可見少量膠原分布；模型組腎組織結(jié)構(gòu)紊亂，腎小管基底膜增厚、扭曲，甚則斷裂，腎間質(zhì)區(qū)可見大量膠原成分沉積，且呈條索狀分布；纈沙坦組及柴苓湯組腎間質(zhì)膠原成分

6、較對照組明顯增多，但較模型組顯著減少。⑶與對照組相比，模型組大鼠腎功能明顯降低，BUN、Scr水平明顯升高（P<0.01），Ccr顯著下降（P<0.01）；與模型組比較，纈沙坦組與柴苓湯組大鼠腎功能明顯好轉(zhuǎn)，BUN、Scr水平顯著降低（P<0.01），Ccr明顯升高（P<0.01）；兩治療組之間比較，上述指標(biāo)差異均無明顯統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。⑷與對照組比較,模型組大鼠血清GSH、CAT含量明顯降低（P<0.01）；與模型組相比，柴

7、苓湯組和纈沙坦組大鼠血清GSH、CAT含量顯著升高（P<0.05或P<0.01）；兩治療組之間比較，上述指標(biāo)差異均無明顯統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。⑸與對照組比較,模型組大鼠尿液8-OhdG、8-iso-PGF2α含量明顯升高（P<0.01）；與模型組相比，柴苓湯組和纈沙坦組大鼠尿液8-OhdG、8-iso-PGF2α含量顯著降低（P<0.05或P<0.01）；兩治療組之間比較，上述指標(biāo)差異均無明顯統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。